骨髄由来巨核球におけるトロンボポエチン受容体発現調節機構の解析

骨髓源性巨核细胞血小板生成素受体表达调控机制分析

• 批准号: 13771085
• 负责人: 春原 正隆
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771085/
• 关键词: TPO; c-mpl; CMK; megakaryocyte; promoter; receptor; c-Mpl; PKC

米国ジェネンテイック社より特別に分与されたTPOにてCMK細胞の分化誘導を行い、細胞表面上TPO受容体(c-Mpl)の発現とプロテインキナーゼC(PKC)の役割について検討いたしましたところ以下の結果を得ました。各種PKC-isoformの局在およびTPO分化誘導時におけるその局在の変化は、共焦点レーザー顕微鏡による解析およびウェスタンブロッチング法による定量的解析を行った結果、PKC-isoformの局在パターンにはバリエーションが認められ、数種類のPKC-isoformにおきましてはTPO分化誘導の前後でその局在の変化が認められておりますまた、TPO分化誘導時におけるc-Mpl、c-mpl mRNA、c-mplプロモーター活性の経時的変化の相関を解析検討いたしましたところ、TPO処理後3時間において細胞表面上c-Mplの急速なダウンレギュレーションが認められ、c-mpl mRNA発現量の経時的変化に関しましてはTPO処理後6時間より増加傾向を示し、処理後9時間で最大となり以降TPO処理前の発現量に回復することを確認しております。そして、c-mplプロモーター活性の経時的変化に関しましては、TPO処理後24時間で最大となり、このプロモーター活性の上昇は各種PKC阻害剤により抑制されることが判明いたしました。一方、PMA処理により、c-mplプロモーター活性が上昇することも確認されております。従いまして、本研究によりTPO受容体(c-Mpl)の発現がPKCにより制御されている可能性が示唆されました(Cell.Mol.Biol.,49,Online,393-398,2003,Sunohara M et al.)本研究は、c-Mpl発現調節機構解明の一助となり、最終的には血小板造血機構解明に寄与する研究であったものと考えられます。

The differentiation of CMK cells was induced by TPO, and the expression of TPO receptor (c-Mpl) on the cell surface was investigated. The results of quantitative analysis of PKC-isoform in the field of TPO differentiation induction, the analysis of PKC-isoform in the field of TPO differentiation induction. Analysis of correlation between c-mpl mRNA and c-mpl mRNA activity and time-dependent changes in c-mpl mRNA expression showed that c-mpl mRNA expression increased at 6 time points after TPO treatment and increased at 9 time points after TPO treatment. The activity of PKC increased at 24 hours after TPO treatment, and the activity of PKC increased at 24 hours after TPO treatment. One side, PMA treatment, c-mpl, and the other side, c-mpl. In this study, the possibility of PKC inhibition in the development of TPO receptor (c-Mpl) was demonstrated (Cell.Mol.Biol., 49,Online,393-398,2003,Sunohara M et al.) This study is aimed at exploring the mechanism of c-Mpl expression and the mechanism of platelet hematopoiesis.

项目成果

Masataka Sunohara: "Modulation of human c-mpl gene expression by thrombopoietin through protein kinase C"Cellular and Molecular Biology. 49. OL393-OL398 (2003)

Masataka Sunohara：“血小板生成素通过蛋白激酶 C 调节人类 c-mpl 基因表达”细胞和分子生物学。

Sunohara-M: "Expression of c-mpl by Thrombopoietin through Protein Kinase C"Journal of DENTAL RESEARCH. Vol.80. 122 (2001)

Sunohara-M：“血小板生成素通过蛋白激酶 C 表达 c-mpl”牙科研究杂志。

Masataka Sunohara: "Protein Kinase C involves in expression of c-mpl by Thrombopoietin"Acta Anatomica Nipponica. 77. 60 (2002)

Masataka Sunohara：“蛋白激酶 C 参与血小板生成素的 c-mpl 表达”Acta Anatomica Nipponica。

Akira Fuse, Masataka Sunohara et al.: "Decreased platelet level in peripheral blood of mice by microgravity"Biol Sci Space. 16(3). 159-160 (2002)

Akira Fuse、Masataka Sunohara 等人：“微重力导致小鼠外周血中血小板水平降低”Biol Sci Space。