側底膜型ペプチドトランスポータの機能解析と遺伝子クローニング

基底外侧膜型肽转运蛋白的功能分析及基因克隆

• 批准号: 13771379
• 负责人: 寺田 智祐
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771379/
• 关键词: ペプチドトランスポータ; ペプチド類似薬物; 小腸; 腎臓; 側底膜; 経細胞輸送

小腸上皮細胞の刷子縁膜に発現するペプチドトランスポータ(PEPT1)は、小分子ペプチドやペプチド類似薬物の吸収を媒介し、生理並びに薬物動態学的に重要な役割を果たしている。さらに近年、ペプチド結合を持たないバラシクロビルなど非ペプチド性化合物もまた、PEPT1に認識・輸送されることが明らかにされ、薬物送達システムの標的分子としても注目されている。一方、小腸上皮細胞の側底膜には、PEPT1とは異なる促進拡散型のペプチドトランスポータが発現し、ペプチド類似薬物の細胞から血管側への移行を媒介している。本研究課題では、1)小腸側底膜型ペプチドトランスポータによる非ペプチド性化合物の認識特性を解析するとともに、2)小腸と腎臓の側底膜型ペプチドトランスポータの機能特性について比較精査した。1)小腸側底膜型ペプチドトラスポータは、PEPT1と同様にδ-アミノレブリン酸など非ペプチド性化合物を認識したが、一部の非ペプチド性化合物は認識しなかった。またδ-アミノレブリン酸の側底膜型ペプチドトランスポータに対する親和性やpHプロファイルは、ペプチド性化合物と類似していた。従って一部の非ペプチド性化合物は、PEPT1と側底膜型ペプチドトランスポータの協調的作用によって経細胞輸送を受けることが明らかになった。また両トランスポータの非ペプチド性化合物に対する認識性の差異は、側底膜型ペプチドトランスポータの遺伝子クローニングを行う際に、有用な知見であることが示唆された。2)腎皮質切片や培養腎上皮細胞を用いた検討より、腎臓には小腸の側底膜型ペプチドトランスポータとは異なる新規ペプチドトランスポータの発現していることを見出した。両トランスポータは、ほぼ類似の基質特異性を有する促進拡散型のトランスポータであるが、基質親和性や輸送の方向性などが大きく異なっていた。この成果は小分子ペプチドやペプチド類似薬物の腸管吸収や腎動態を考える上で、有用な基礎的知見になりうると考えられる。

Intestinal epithelial cell brush membrane membrane filter, small molecule filter It is similar to the absorbing medium of the plant, and it is also important in the physiology and dynamics of the plant. In recent years, さらに, ペプチド combines たないバラシクロビルなど non-ペプチド compound もまた, PEPT1にKnow and deliver the されることが明らかにされ, and the molecule delivered to the システムのtarget molecule としてもAttention されている. On the one hand, the lateral basal membrane of the small intestinal epithelial cells, PEPT1 and the different linings promote the loosening type of lining. The ンスポータが発appears, and the ペプチドsimilar to the 薬物のcellsからthe blood vessel side and the migration をmediator している. This research topic is: 1) Solution to the recognition and characteristics of small intestinal lateral basal membrane type non-dactyl compounds Analyze the functional characteristics of the basal membrane type lateral basement membrane of the small intestine and kidney, 2) Comparative and detailed inspection of the functional characteristics of the するとともに. 1) Small intestinal lateral basal membrane type ペプチドトラスポータは, PEPT1と同様にδ-アミノレブリン acidなど无ペプチド性性药器知したが, 一部の无ペプチド性性综合性综合はKnowledge しなかった.またδ-アミノレブリン acid の side bottom film type ペプチドトランスポータに対すThe るaffinitive pH-resistant compounds are similar to していた. Non-toxic compound, PEPT1 and side bottom film type non-toxic compound The role of スポータのcoordination is the function of cell transport.また両トランスポータの Non-ペプチド compound に対する cognizability difference は, side base membrane type ペプチドトランスポータの缝子クローニングを行う记に, 用な知见であることが时攆された. 2) Renal cortical slices and cultured renal epithelial cells are used for kidney epithelial cell culture and kidney epithelial cell culture.トランスポータとはdifferent なる新码ペプチドトランスポータの発成していることを见出した.両トランスポータは、ほぼsimilar matrix specific を有するpromoting loosening type のトランスポータであるが, matrix affinity and transport のdirectionality などが大きくisoなっていた. The results of the small molecules are similar to the intestinal absorption of the drug, and the kidney dynamics are tested, and the knowledge based on the useful knowledge is tested.

项目成果

Irie et al.: "Recognition and transport characteristics of nonpeptidic compounds by basolateral peptide transporter in Caco-2 cells"J. Pharmacol. Exp. Ther.. 298・2. 711-717 (2001)

Irie 等：“Caco-2 细胞中的非肽化合物的识别和转运特性”J. Pharmacol. 711-717 (2001)。

Sawada et al.: "Distinct transport characteristics of basolateral peptide transporters between MDCK and Caco-2 cells"Pfluger Arch.-Eur. J. Physiol.. 443・1. 31-37 (2001)

Sawada 等：“MDCK 和 Caco-2 细胞之间的基底外侧肽转运蛋白的独特转运特征”Pfluger Arch.-Eur. J. Physiol.. 443・1 (2001)。

Pan et al.: "Diurnal rhythm of H^+/peptide cotransporter (PEPT1) in the rat small intestine"Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.. (in press). (2002)

Pan等人：“大鼠小肠中H^/肽协同转运蛋白(PEPT1)的昼夜节律”Am。