側底膜型ペプチドトランスポータの機能解析と遺伝子クローニング

基底外侧膜型肽转运蛋白的功能分析及基因克隆

• 批准号: 13771379
• 负责人: 寺田 智祐
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771379/
• 关键词: ペプチドトランスポータ; ペプチド類似薬物; 小腸; 腎臓; 側底膜; 経細胞輸送

小腸上皮細胞の刷子縁膜に発現するペプチドトランスポータ(PEPT1)は、小分子ペプチドやペプチド類似薬物の吸収を媒介し、生理並びに薬物動態学的に重要な役割を果たしている。さらに近年、ペプチド結合を持たないバラシクロビルなど非ペプチド性化合物もまた、PEPT1に認識・輸送されることが明らかにされ、薬物送達システムの標的分子としても注目されている。一方、小腸上皮細胞の側底膜には、PEPT1とは異なる促進拡散型のペプチドトランスポータが発現し、ペプチド類似薬物の細胞から血管側への移行を媒介している。本研究課題では、1)小腸側底膜型ペプチドトランスポータによる非ペプチド性化合物の認識特性を解析するとともに、2)小腸と腎臓の側底膜型ペプチドトランスポータの機能特性について比較精査した。1)小腸側底膜型ペプチドトラスポータは、PEPT1と同様にδ-アミノレブリン酸など非ペプチド性化合物を認識したが、一部の非ペプチド性化合物は認識しなかった。またδ-アミノレブリン酸の側底膜型ペプチドトランスポータに対する親和性やpHプロファイルは、ペプチド性化合物と類似していた。従って一部の非ペプチド性化合物は、PEPT1と側底膜型ペプチドトランスポータの協調的作用によって経細胞輸送を受けることが明らかになった。また両トランスポータの非ペプチド性化合物に対する認識性の差異は、側底膜型ペプチドトランスポータの遺伝子クローニングを行う際に、有用な知見であることが示唆された。2)腎皮質切片や培養腎上皮細胞を用いた検討より、腎臓には小腸の側底膜型ペプチドトランスポータとは異なる新規ペプチドトランスポータの発現していることを見出した。両トランスポータは、ほぼ類似の基質特異性を有する促進拡散型のトランスポータであるが、基質親和性や輸送の方向性などが大きく異なっていた。この成果は小分子ペプチドやペプチド類似薬物の腸管吸収や腎動態を考える上で、有用な基礎的知見になりうると考えられる。

Small intestinal epithelial cells の brush try membrane に 発 now す る ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ PEPT1 は, small molecule ペ プ チ ド や ペ プ チ ド similar 薬 content の suction 収 を medium し, physiological and び に 薬 material dynamics of important な に "を cut fruit た し て い る. さ ら に in recent years, ペ プ チ ド combining を hold た な い バ ラ シ ク ロ ビ ル な ど non ペ プ チ ド sex compound も ま た, PEPT1 に know, conveying さ れ る こ と が Ming ら か に さ れ, 薬 served シ ス テ ム の target molecules と し て も attention さ れ て い る. Side, small intestinal epithelial cells の side bottom film に は, PEPT1 と は different な る promote company, dispersion type の ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ が 発 し, ペ プ チ ド similar 薬 material の cells か ら vascular side へ の transitional を medium し て い る. This research topic で は type, 1) side of the small intestine membrane ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ に よ る non ペ プ チ cognition compounds の ド features を parsing す る と と も に, 2) the small intestine is crucial と renal の side bottom type membrane ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ の function features に つ い て comparative fine check し た. 1) side of the small intestine basilar membrane type ペ プ チ ド ト ラ ス ポ ー タ は, PEPT1 と with others に delta - ア ミ ノ レ ブ リ ン acid な ど non ペ プ チ cognition compounds を ド し た が, a の ペ プ チ cognition compounds は ド し な か っ た. ま た delta - ア ミ ノ レ ブ リ ン acid の side bottom type membrane ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ に す seaborne る affinity や pH プ ロ フ ァ イ ル は, ペ プ チ と ド sex compounds similar し て い た. 従 っ て a の non ペ プ チ ド compounds は, PEPT1 と side bottom type membrane ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ の coordinating role に よ っ て conveying を 経 cells by け る こ と が Ming ら か に な っ た. ま た struck ト ラ ン ス ポ ー タ の non ペ プ チ ド sex compound に す seaborne る recognizing sexual の differences は, side bottom type membrane ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ の posthumous son 伝 ク ロ ー ニ ン グ を line う interstate な に and useful knowledge で あ る こ と が in stopping さ れ た. 2) renal cortical slices や を culture renal epithelial cells with い た beg よ 検 り is crucial, kidney に は small intestine の side bottom type membrane ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ と は different な る new rules ペ プ チ ド ト ラ ン ス ポ ー タ の 発 now し て い る こ と を shows し た. That struck ト ラ ン ス ポ ー タ は, ほ ぼ similar の substrate specificity を す る promote company, dispersion type の ト ラ ン ス ポ ー タ で あ る が, substrate affinity や conveying の directional な ど が big き く different な っ て い た. こ の results は small molecule ペ プ チ ド や ペ プ チ ド similar 薬 content の insufflate suction 収 や renal dynamic を exam え る な で and useful basic knowledge on に な り う る と exam え ら れ る.

项目成果

Irie et al.: "Recognition and transport characteristics of nonpeptidic compounds by basolateral peptide transporter in Caco-2 cells"J. Pharmacol. Exp. Ther.. 298・2. 711-717 (2001)

Irie 等：“Caco-2 细胞中的非肽化合物的识别和转运特性”J. Pharmacol. 711-717 (2001)。

Sawada et al.: "Distinct transport characteristics of basolateral peptide transporters between MDCK and Caco-2 cells"Pfluger Arch.-Eur. J. Physiol.. 443・1. 31-37 (2001)

Sawada 等：“MDCK 和 Caco-2 细胞之间的基底外侧肽转运蛋白的独特转运特征”Pfluger Arch.-Eur. J. Physiol.. 443・1 (2001)。

Pan et al.: "Diurnal rhythm of H^+/peptide cotransporter (PEPT1) in the rat small intestine"Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.. (in press). (2002)

Pan等人：“大鼠小肠中H^/肽协同转运蛋白(PEPT1)的昼夜节律”Am。