新規CD28ファミリー分子AILIMを介するシグナル伝達機構の解析

新型CD28家族分子AILIM介导的信号转导机制分析

• 批准号: 13771389
• 负责人: 原田 陽介
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771389/
• 关键词: T細胞; 補助シグナル; CD28; ICOS; AILIM; T細胞活性化

AILIM/ICOSは、CD28シグナルと同様にT細胞の増殖やINF-γ、IL-4の産生を誘導するが、CD28シグナルとは違いIL-2産生の増強をほとんど起こさないことが分かっている。そこで、我々はこのような違いがどのようなシグナル伝達経路の違いで生まれてくるのかを解析した。CD28の細胞内領域にはYMNM motifが存在し、PI3-KinaseとGrb2が結合することが知られている。一方、AILIMには同じ位置にYMFM motifが存在しておりPI3-Kinaseは結合するがGrb2は結合しない。我々はAILIMがIL-2promoterの活性化をほとんど起こさないのは、AILIMにGrb2が結合できないことがその理由の1つであるのではないかと考え、AILIMにGrb2を結合させるためにYMFM motifのFをNに置換した変異遺伝子AILIM YMNMを作製しIL-2 promoterの活性を検討した。その結果、この1アミノ酸の変位によりAILIMはIL-2 promoterの活性化を誘導することができるようになった。さらにIL-2 promoter上のどの領域を活性化しているのかを検討したところ、Grb2をAILIMに結合させることでNFAT/AP-1 siteの活性化はCD28と同等に誘導できるようになったが、CD28RE/AP-1 siteとNFκB siteの活性化は十分にはおこらず、YMNM motif以外のCD28細胞内領域がこれらの領域の活性化に必要であることが分かった。これらの結果は、Grb2の結合に影響を与える1アミノ酸の違いがCD28とAILIMを介する補助シグナルの機能的な違いを決定する一因であることを示唆している。

AILIM/ICOS は, CD28 シ グ ナ ル と with others に t-cell の raised colonization や INF - gamma, IL - 4 の produce を induced す る が, CD28 シ グ ナ ル と は violations い IL - 2 の raised strong を ほ と ん ど up こ さ な い こ と が points か っ て い る. そ こ で, I 々 は こ の よ う な violations い が ど の よ う な シ グ ナ ル 伝 の violations of 経 road い で raw ま れ て く る の か を parsing し た. CD28 の intracellular domain に は YMNM motif が exist し, PI3 Kinase と Grb2 が combining す る こ と が know ら れ て い る. Side, AILIM に は position with じ に YMFM motif が exist し て お り PI3 Kinase - は combining す る が Grb2 は combining し な い. I 々 は AILIM が IL - 2 promoter の activeness を ほ と ん ど up こ さ な い の は, AILIM に Grb2 が combining で き な い こ と が そ の reason の 1 つ で あ る の で は な い か と え test, AILIM に Grb2 を combining さ せ る た め に YMFM motif <s:1> FをNに substituts the <s:1> た variant 伝 AILIM YMNMを to produce an <s:1> IL-2 promoter <s:1> activity を検 to obtain た た. そ の results, こ の 1 ア ミ の ノ acid - a に よ り AILIM は IL - 2 promoter の activeness を induced す る こ と が で き る よ う に な っ た. さ ら に IL - 2 on the promoter の ど の field を activeness し て い る の か を beg し 検 た と こ ろ, Grb2 を AILIM に combining さ せ る こ と で NFAT/AP - 1 site の activeness は CD28 と equal に induced で き る よ う に な っ た が, CD28RE/AP - 1 Site と NF kappa B site の predominate activeness は very に は お こ ら ず, YMNM motif outside の CD28 intracellular domain が こ れ ら の field の activeness に necessary で あ る こ と が points か っ た. こ れ ら の results は, Grb2 の に influence を with え る 1 ア ミ ノ acid の violations い が CD28 と AILIM を interface す る subsidies シ グ ナ ル の functionary な violations い を decided す る due to で あ る こ と を in stopping し て い る.

项目成果

Harada, Y.: "Novel role of phosphatidylinositol 3-kinase in CD28-mediated costimulation"J Biol Chem. 276. 9003-9008 (2001)

Harada, Y.：“磷脂酰肌醇 3-激酶在 CD28 介导的共刺激中的新作用”J Biol Chem。

Harada, Y.: "Critical requirement for the membrane-proximal cytosolic tyrosine residue for CD28-mediated costimulation in vivo"J Immunol. 166. 3797-3803 (2001)

Harada, Y.：“CD28 介导的体内共刺激对近膜胞质酪氨酸残基的关键要求”J 免疫学杂志。

Harada et al.: "A single amino acid alteration in cytoplasmic domain determines IL-2 promoter activation by ligation of CD28but not inducible costimulator (ICOS)"Journal of experimental medicine. 197・2. 257-262 (2003)

Harada 等人：“细胞质结构域中的单个氨基酸改变通过连接 CD28 而不是诱导共刺激物 (ICOS) 决定 IL-2 启动子激活”实验医学杂志 197・2 (2003)。