Pulsed ELDOR detected NMRによるタンパク内分子の構造解析

通过脉冲 ELDOR 检测 NMR 对蛋白质内的分子进行结构分析

• 批准号: 13780494
• 负责人: 三野 広幸
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780494/
• 关键词: ESR; ENDOR; ELDOR; Mn; Photosystem II; タンパク質; 構造解析; NMR; 光合成; Mn錯体

一般に近傍核の観測には(パルス)ENDORという手法が用いられるが、ENDORには周波数特性、周波数限界など技術的問題が多い。実際ENDORでは1000MHz以上の大きさのNMR遷移を捉えることは技術的に困難である。実際に市販品のESR機では100MHz以下のNMR遷移が観測限界となっている。パルスELDOR法はパルスESR法の手法のなかでも手付かずの領域であった。当研究課題ではPulsed ELDOR detected NMR法を開発し、生物系への応用を目指すものであった。当初予想においてはこの手法を用いれば高感度化が実現し、それによって低濃度測定が強いられる生物系への測定に大きなメリットがあると考えられた。しかし、スペクトルの高分解能条件では必ずしも高感度化を謳うことは適切ではないことはわかった。さらに、実験を進める中でこの手法によれば非常に広い周波数範囲の測定がたやすくできることがわかった。実際1000MHzの範囲でのマンガン原子のNMR信号をたやすく観測することができた。もしこれを既存のENDOR法などで行おうとすれば数種類の高価なNMR用アンプと数種類の測定用プローブを試作測定しなければならないだろう。Pulsed ELDOR detected NMR法広い周波数特性は当初予想していなかったものの最大のメリットであるということができる。今後ますます発展が期待できる手法であることもわかった。方法を模索していく中、生物系への応用も初めての例として雑誌に受理されている。これらの結果によって当初研究計画の目標は果たせたものと考えられる。

In general, there are many problems with the ENDOR ENDOR technique, the ENDOR frequency characteristic, and the frequency limit technique. The ENDOR is a large-scale NMR transfer technology with a speed of 1000 MHz or above, which is difficult to solve. The commercially available ESR machine has a measurement limit of NMR migration below 100 MHz. The パルスELDOR method is the ESR method and the technique is the technique. When the research topic is Pulsed ELDOR detected NMR method, the method is opened, and the biology department is using the method. I originally thought of using the technique of "においてはこの" to use "いれば" to make it highly sensitive, and "それによってlow" Concentration determination is strong and the biology department is measuring the concentration.しかし、スペクトルのHigh resolution energy condition では必ずしもHigh sensitivity をうことはappropriate ではないことはわかった.さらに、実験を入める中でこのtechniqueによればvery に広いfrequency range 囲のdetermination がたやすくできることがわかった. The NMR signal of the 1000MHz NMR atom is measured. NMR of the existing ENDOR method Use アンプと to measure several kinds of しローブを trial and measure しなければならないだろう. Pulsed ELDOR detected NMR method 広いfrequency characteristicsは originally thought that the maximum していなかったもののMAXのメリットであるということができる. In the future, I look forward to the future development of the show and the technique of the show. The method is していく中, and the biology department is への応用も初めての Example として雑志にacceptance されている. The result of the research project is the result of the original research project.