血球系以外の組織におけるチロシンキナーゼSykの機能解析

血细胞以外组织中酪氨酸激酶Syk的功能分析

• 批准号: 13780506
• 负责人: 定 清直
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780506/
• 关键词: 細胞内情報伝達機構; 蛋白質チロシンリン酸化反応; 蛋白質チロシンリン酸化酵素; アダプター蛋白質; Syk; 3BP2

昨年の成果に基づき、チロシンキナーゼSykの機能解析を継続した。1.標的分子の同定と機能解析:昨年度Syk会合蛋白質の一つとして酸化ストレスにより活性化するp21-activated protein kinase (γ-PAK)を同定した。本年度は、非血液細胞を用いて浸透圧と酸化ストレスによるシグナル伝達系路におけるPAKとSykの機能について解析を行った。PAK-Syk会合がSykのキナーゼ活性を正に制御し、細胞内局在変化や下流のJNK活性を刺激していることを見出した(投稿中)。さらにSykの基質であるRING型ユビキチン・リガーゼc-CblによるチロシンキナーゼLynのユビキチン化とキナーゼ活性のダウン・レギュレーションを見出した(投稿中)。2.新規Syk標的分子3BP2の機能解析:昨年度新規Syk標的分子として同定した3BP2は他のグループによりヒトの遺伝疾患ケルビン症の原因遺伝子であり顎骨の破骨細胞の機能異常に関わることが報告された(Ueki, et al. Nat. Genet.2001)。本年度は3BP2がマスト細胞の抗原による活性化を正に制御する分子であることを報告した(Sada, et al. Blood 2002)。アレルギー反応に関わるマスト細胞において3BP2は抗原刺激による細胞内カルシウムイオン濃度上昇と脱顆粒反応を制御する重要な因子であることが見出され、その制御がアレルギー疾患の治療に応用出来る可能性が明らかとなった。Sykによる3BP2のリン酸化部位としてチロシン174、183、446を同定し、446のチロシンリン酸化がチロシンキナーゼLynとの会合に必須であることを見出した(投稿中)。3.遺伝子治療の可能性の探究:Sykの基質であるCbl/Cbl-bのアミノ末端に細胞膜局在配列を付加したキメラ分子を作成し、細胞に導入することにより癌細胞の増殖における作用を解析した。血液系のマスト細胞では抗原受容体とチロシンキナーゼのユビキチン化の増強が見出され、抗免疫・抗腫瘍効果をもつ遺伝子治療への可能性が見出されたが、非血液系の細胞では著明な影響が見られなかった。

Last year's results were based on the analysis of Syk's functions. 1. The identity and function of the target molecule were analyzed. The identity of p21-activated protein kinase (γ-PAK) was determined by the activity of Syk protein. This year, the non-blood cells were used for the analysis of PAK and Syk functions. PAK-Syk Syndicate Syk's JNK Activity is Regulated, Intracellularly Regulated and Downstream JNK Activity Stimulated (Submission) The basis of Syk is shown in the Ring-Type Exchange and Exchange of Syk. 2. Functional analysis of 3BP2, the new Syk target molecule: A report on 3BP2, the new Syk target molecule, was published yesterday (Ueki, et al. Nat. Genet.2001). This year's report is on the activation of 3BP2 antigens in cells (Sada, et al. Blood 2002). 3BP2 is an important factor in the regulation of anti-inflammatory activity in cells and the treatment of diseases. The acid sites of 3BP2 and 446 are the same, and the acid sites of 446 and 446 are the same. 3. Study on the possibility of gene therapy: analysis of the role of Cbl/Cbl-b in the proliferation of cancer cells The increase in antigen receptor activity in blood cells, the possibility of anti-immune and anti-tumor therapy, and the effect on non-blood cells were observed.

项目成果

定 清直: "マスト細胞におけるアダプター蛋白質3BP2の役割"アレルギー科. 15(3)(in press). (2003)

Kiyonao Sada：“肥大细胞中接头蛋白 3BP2 的作用”15(3)（出版中）。

Sada, K.: "SH2 domain-mediated targeting, but not localization, of Syk in the plasma membrane is critical for FcεRI signaling pathway"Blood. 97・5. 1352-1359 (2001)

Sada, K.：“质膜中 Syk 的 SH2 结构域介导的靶向而非定位对于 FcεRI 信号通路至关重要”Blood.97·5。

Sada, K.: "Regulation of FcεRI-mediated degranulation by an adaptor protein 3BP2 in rat basophilic leukemia RBL-2H3 cells."Blood. 100(6). 2138-2144 (2002)

Sada, K.：“接头蛋白 3BP2 在大鼠嗜碱性白血病 RBL-2H3 细胞中调节 FcεRI 介导的脱粒”，Blood 100(6) 2138-2144 (2002)。

Gao, S.: "A novel phenoxazine derivative suppresses surface IgM expression in DT40 B cell line"Brit. J. Pharmacol.. 137(6). 749-755 (2002)

高，S.：“一种新型吩恶嗪衍生物抑制 DT40 B 细胞系中的表面 IgM 表达”Brit。

He, J.: "Syk is required for p38 activation and G2/M arrest in b cells exposed to oxidative stress"Antioxidnants & Redox Signaling. (in press). (2002)

He, J.：“暴露于氧化应激的 b 细胞中 p38 激活和 G2/M 期停滞需要 Syk”