インテグリン裏打ち蛋白質群による上皮細胞の細胞運動性制御機構の解析

整合素衬里蛋白对上皮细胞运动控制机制的分析

• 批准号: 13780581
• 负责人: 矢野 元
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780581/
• 关键词: インテグリン; 細胞生物学; チロシンリン酸化; パキシリン; p130Cas; Fak; Pyk2

今年度は平成13年度において確立したRNA干渉発現抑制系を用い、各インテグリン裏打ち蛋白質群の細胞運動制御や細胞形態維持における役割を検討した(投稿準備中)。また本系を用いることにより、並行して解析を行っていたチロシンリン酸化paxillinとp120RasGAPの結合を介した低分子量G蛋白質Rhoの活性制御機構の存在を証明することに資することができた(JCB 159,673-683,2002)。チロシンリン酸化の基質となりうるインテグリン裏打ち蛋白質、paxillin, p130Casおよびそれらの上流のキナーゼであるFak, Pyk2について、RNA干渉発現抑制による細胞形態および運動性の変化を観察したところ、HeLa細胞、およびHUVEC(ヒト静脈内皮細胞)のいずれも上皮系の細胞においてのみFak, paxillinの発現抑制下において、通常観察されない20μmを超える突起の形成が観察された。Pyk2,p130Cas発現抑制下においては著明な形態変化は観察されなかったが、細胞運動性の低下が観察された。Fak, paxillinの発現抑制による異常形態の形成は、運動に伴う細胞基質間接着消失の失調に随伴するものではなく、細胞骨格の一成分である微小管系の細胞内部からの異常な伸長によるものであった。さらに詳細な形態観察の結果、焦点接着の形成および微小管末端到達に失調が生じていること、それに伴いCLIP170で可視化される微小管伸長が異常突起内に濃縮していることが観察され、チロシンリン酸化シグナルを伴うインテグリンシグナルが微小管構築において重要な役割を果たしうることが新たに示唆される結果となった。

Our は pp.47-53 13 year に お い て establish し た RNA dry involved 発 now inhibit を use い, various イ ン テ グ リ playing ち ン protein group of sports system royal や の cells form maintain に お け る service cut を beg し 検 た (contribute to). を use い ま た the department to る こ と に よ り, parallel し analytical line を っ て て い た チ ロ シ ン リ ン acidification paxillin と p120RasGAP の combining を interface し た low molecular weight G protein Rho の active system of imperial institutions の を exists to prove that す る こ と に endowment す る こ と が で き た (JCB 159,673-683,2002. チ ロ シ ン リ ン acidification の matrix と な り う る イ ン テ グ リ playing ち ン protein, paxillin, p130Cas お よ び そ れ ら の upper の キ ナ ー ゼ で あ る Fak (, Pyk2 に つ い て, RNA dry involved 発 now inhibit に よ る cells form お よ び motility の variations change を 観 examine し た と こ ろ, HeLa, お よ び HUVEC (ヒ ト venous endothelial cells) の い ず れ も epithelial cell の に お い て の み Fak (, Under the inhibition of paxillin, にお て て, usually 観 observe されな されな 20μmを super-え る protrusions <e:1> form が観 observe された. Pyk2, p130Cas 発 now curb に お い て は zhao Ming な morphology variations は 観 examine さ れ な か っ た が low, cell motility の が 観 examine さ れ た. Fak (, paxillin の 発 now inhibit に よ る abnormal formation の は disappear and sports に う cell matrix with indirect の disorder に with accompanying す る も の で は な く, cell skeleton の で as an ingredient あ る tiny piping の intracellular か ら の abnormal な elongation に よ る も の で あ っ た. さ ら に detailed な 観 examine の results, focus and then の form お よ び tiny tube end reach に disorder が raw じ て い る こ と, そ れ に with い CLIP170 で visualization さ れ inside tiny abnormal elongation が tube る に enrichment し て い る こ と が 観 examine さ れ, チ ロ シ ン リ ン acidification シ グ ナ ル を with う イ ン テ グ リ ン シ グ ナ ル が tiny tube building に お い て important な "を cut fruit た し う る こ と が new た に in stopping さ れ る results と な っ た.

项目成果

Tsubouchi, A., Sakakura, J., Yagi, R., Mazaki, Y., Schaefer, E., Yano, H., Sabe, H.: "Localized Suppression of RhoA activity by Tyr31/118-phosphorylated paxillin in cell adhesion and migration"Journal of Cell Biology. 159・4. 673-683 (2002)

Tsubouchi, A.、Sakakura, J.、Yagi, R.、Mazaki, Y.、Schaefer, E.、Yano, H.、Sabe, H.：“细胞中 Tyr31/118 磷酸化桩蛋白对 RhoA 活性的局部抑制粘附和迁移”细胞生物学杂志.159・4.673-683(2002)