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自己支持性ハニカムネットを用いた選択的細胞分離法の開発

使用自支撑蜂窝网选择性细胞分离方法的开发

基本信息

批准号：
13780666
负责人：
田中賢
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

Poly(ε-caprolacton)(PCL)と両親媒性アクリルアミド共重合体を重量比10:1で混合したクロロホルム溶液をガラスシャーレ上に1〜20mlキャストすることで製膜した。2〜20μmの孔径を有する多孔質薄膜を、シリコーンパッキンで挟み込み、人新鮮血を濾過した。濾過前後の細胞数は血球カウンターを用いて求めた。濾過時の活性化の指標として、β-TG産生量や溶血の確認を行った。孔径が5.5〜9.8μmの多孔質薄膜を用いて人血液の濾過を行った場合、濾過血液中に白血球の存在は認められなかった。白血球は孔にトラップまたは幹に吸着していた。PCL膜表面は、血小板の粘着数・形態変化が多く、濾過血液中の血小板回収率の低下が観測された。一方、水不溶性で粘着性の高い新規血液適合性高分子:Poly(2-methoxyethyl acrylate)(PMEA)の0.1wt% MeOH溶液でコーティングしたPCL膜では、血小板の粘着がほとんど起こらないため、血小板回収率が上昇した。β-TG産生量は、PMEA未コーティング時に比べ約半分以下であった。さらに、濾過前後の血漿のUV-Visスペクトル測定の結果、Oxyhemoglobin由来のピークがPMEA未コーティング時に比べ有意に低下し溶血がほとんど生じないことが分かった。PMEAコーティング膜は、分離性能を維持したまま、染み出し・濾過速度を大きくできることも分かった。以上の結果から、孔径の均一な多孔質薄膜と血液適合性表面処理を組み合わせることで、細胞分離膜に要求される高選択分離性能と細胞や血液成分へのダメージの小さい表面が構築できることが明らかになった。この多孔質薄膜は、目的とする細胞をソフトトラップできるので、再生医療のためのインプラントデバイスとしても有用であると考えられる。

Poly(ε-caprolacton)(PCL) and compatibility compatibility アクリルアミド total overlap body を weight ratio 1 0:1でmixed キロロホルムsolution をガラスシャーレ上に1~20ml キャストすることでfilm-making system. There are porous membranes with a pore size of 2 to 20 μm, シリコーンパッキンで挟み込み, and human fresh blood filtration. The number of cells before and after filtration and the number of blood cells can be calculated using いて. The indicators of activation during filtration and the amount of β-TG produced and the confirmation of hemolysis are confirmed. The porous film with a pore size of 5.5 to 9.8 μm can be used to filter human blood and detect the presence of white blood cells in the blood. White blood cells are sucked and sucked. The surface of the PCL membrane, the number of adhesion and morphological changes of platelets, and the low recovery rate of platelets in the filtered blood were measured. On the one hand, a new blood-compatible polymer with high water-insoluble adhesion and high adhesiveness: Poly (2-methoxyethyl acrylate) (PMEA) 0.1wt% MeOH solution can be used for PCL membrane, platelet adhesion can be improved, and platelet recovery rate cannot be increased. The amount of β-TG produced is less than half a minute compared to PMEA at the same time. UV-Visibility test results of blood plasma before and after filtration, origin of OxyhemoglobinのピークがPMEA is not コーティング时に than べ intentional に is lower し hemolysis がほとんど生じないことが分かった. PMEA コーティング membrane は, separation performance したままま, dyeing みし・filtration speed を大きくできることも分かった. The above results are the key points, the porous film with uniform pore size, the blood-compatible surface treatment combination and the cell separation membrane are Find the high separation performance of cells and blood components and the small surface of the cells.このporous film は, purpose とする cell をソフトトラップできるので, regeneration Medical medical treatment is useful.