课题基金 / 基金详情

超臨界流体中での脂質修飾酵素を用いる酵素触媒反応

超臨界流体中での脂質修飾酵素を用いる酵素触媒反応
在超临界流体中使用脂质修饰酶的酶催化反应
批准号：
13875180
负责人：
岡畑 恵雄
金额：
$1.41万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2001 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13875180/
关键词：
超臨界流体二酸化炭素フルオロホルムβ-D-ガラクトシダーゼ溶媒和配糖化反応

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项目成果

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本研究は、脂質修飾糖加水分解酵素を用いて二酸化炭素超臨界流体中での位置選択的な糖転移反応を行うことを目的としている。最近、温度や圧力を変化させるだけで極性や密度が大きく変わる反応媒体として注目されている「超臨界琉体」中で酵素反応を行うことを計画し、以下の結果を得た。1)β-D-ガラクトシダーゼの水溶液とカチオン性脂質の水溶液を混合することにより、沈殿として脂質修飾酵素を得た。これを凍結乾燥したのち、タンパク含量や酵素活性を吸収スペクトルや活性部位滴定法で定量した。2)二酸化炭素ガスを31℃、73気圧以上で超臨界状態にしたのち、耐圧ガラス容器に脂質修飾β-D-ガラクトシダーゼ、糖供与体であるラクトース、受容体であるオクタノールを加えて反応を行った。所定時間後、減圧にして炭酸ガスとして反応媒体を気化した後、生成物の分析を液体クロマトグラフィーで行った。その結果、オクタノールヘの配糖化反応は、イソオクタンなどの有機溶媒中に比べて約10倍速くなった。3)圧力と温度を変えることにより超臨界流体の密度と極性が自由に制御できるので、種々の反応条件下で酵素反応速度を検討した。その結果40℃、50気圧の時に反応速度は最大になり、酵素反応速度を超臨界流体の圧力と温度を変えることにより可逆的に制御できることがわかった。4)超臨界流体としてフルオロホルム(CHF_3)についても検討したところ、二酸化炭素よりもさらに反応性が10倍も向上し、圧力と温度により同じように反応速度が可逆的に制御できることがわかった。
期刊论文(5)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
T.Mori, S.Kishimoto, K.Ijiro, A.Kobayashi, Y.Okahata: "A Lipid-coated Lipase as an Efficient Hydrolytic Catalyst in the Two-phase Aqueous-Organic System"Biotech. & Bioeng.,. 76. 157-163 (2001)
T.Mori、S.Kishimoto、K.Ijiro、A.Kobayashi、Y.Okahata：“脂质包被的脂肪酶作为两相水有机系统中的高效水解催化剂”生物技术。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
T.Mori, Y.Okahata: "Preparation of a 1Lpid-Coated Enzyme and Activity for Reverse Hydrolysis Reactions in Homogeneous Organic Media"Methods in Biotechnology. 15. 83-94 (2001)
T.Mori、Y.Okahata：“1Lpid 包被酶的制备及其在均质有机介质中逆水解反应的活性”生物技术方法。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
T.Mori, M.Funasaki, A.Kobayashi, Y.Okahata: "Reversible activity changes of a lipid-coated lipase for enantioselective esterification in supercritical fluoroform"Chem. Commun.. 1832-1833 (2001)
T.Mori、M.Funasaki、A.Kobayashi、Y.Okahata：“超临界氟仿中对映选择性酯化的脂质包被脂肪酶的可逆活性变化”Chem。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
森 俊明, 舟崎 真理子, 小林 厚志, 岡畑 恵雄: "超臨界流体中での酵素反応の制御 -超臨界フルオロフォルム中での脂質修飾リパーゼを用いた不斉選択的エステル化反応-"高分子論文集、超臨界特集号. 58. 564-568 (2001)
Toshiaki Mori、Mariko Funasaki、Atsushi Kobayashi、Keio Okahata：“超临界流体中酶促反应的控制 - 在超临界氟仿中使用脂质修饰脂肪酶的不对称选择性酯化反应 -” 聚合物论文 58. 564-568 (2001)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
振幅可変型水晶発振子を用いる複雑系タンパク質間相互作用の解明
  • 批准号：
    16655066
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    岡畑 恵雄
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
振幅変動型水晶発振子を用いる複雑系タンパク質の相互作用の解明
  • 批准号：
    14658184
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.11万
  • 财政年份：
    2002
  • 负责人：
    岡畑 恵雄
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
一分子ポリマーサイエンス
  • 批准号：
    13895022
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $2.05万
  • 财政年份：
    2001
  • 负责人：
    岡畑 恵雄
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
水晶発振子を用いる分子シンクロナイゼーションの定量的評価
  • 批准号：
    13022223
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $2.69万
  • 财政年份：
    2001
  • 负责人：
    岡畑 恵雄
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
海外基金