骨髄幹細胞から分化・誘導される膵内分泌細胞の同定

骨髓干细胞分化诱导的胰腺内分泌细胞的鉴定

• 批准号: 13877189
• 负责人: 後藤 満一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877189/
• 关键词: islet; regeneration; green mouse; bone marrow transplantation; chimerism; PCNA; streptozotocin

今回、膵における骨髄由来細胞の分布と再生膵島への関与を経時的に検討した。骨髄由来細胞の動態を可視化し追跡するためにgreen fluorescent protein(以下,GFP)を遺伝子導入し全身臓器に発現させたグリーンマウスの骨髄細胞をドナーとして用いた。C57BL/6系マウスに12Gy致死放射後、1x10^6個の骨髄細胞を移植し、骨髄キメラ率とともに組織でのGFP陽性細胞を検討した。骨髄キメラ率は移植後1週、4週、12週にそれぞれ40±18.5%、82.6±23.4%、72±18%となり、GFP陽性細胞は肺、肝、小腸、腎、膵の網内系や間質に認められた。次に膵島再生モデルをもちいて検討した。上記キメラマウスに膵島の破壊、再生が誘導される200mg/kgのstreptozotocin (STZ)を投与し、その後1日目、3日目、7日目に膵臓を摘出し、凍結切片、蛍光顕微鏡下に検討した。投与後1日目の組織ではβ細胞は著しく障害され、膵島内に内分泌顆粒(インスリン)の放出像がみられたが、3日目には修復や再生像がみられ、一部の膵島では正常に近い形態を示した。しかし、膵島数は高血糖の影響か、著しく減少した。PCNA陽性細胞は1日目の膵島内および膵管上皮に多く認め、その後の3日目、7日目も陽性細胞を認めた。1日目には膵島内に多数のGFP陽性細胞を認めたが、形態的には浸潤した炎症細胞と思われた。3日目ではその数は減少した。しかし、インスリンの染色性を持つ細胞は同定できなかった。この再生誘導条件では充分な膵島の再生が誘導できないので、今後、高血糖の持続によるβ細胞の障害を除き膵島再生をさらに長期に継続できるモデルでの実験、すなわちSTZ投与後に血糖を正常化させる同系膵島移植モデルでの検討を計画している。

This time, the 膵における bone marrow originates from the distribution of と regeneration 膵 island へ <e:1>, which is related to the に検 of を time and the た discussion of た. Bone marrow origin cells の を dynamic visualization し tracing す る た め に green fluorescent protein (GFP), at the を heritage 伝 son import し systemic viscera に 発 now さ せ た グ リ ー ン マ ウ ス の bone marrow cells を ド ナ ー と し て in い た. Department of C57BL / 6 マ ウ ス に 12 gy to death after radiotherapy, 1 x10 ^ 6 の し を bone marrow cells transplantation, bone marrow キ メ ラ rate と と も に organization で の GFP positive cells を beg し 検 た. Rate of bone marrow キ メ ラ は 1 weeks, 4 weeks, 12 weeks after transplantation に そ れ ぞ れ 40 + / - 18.5%, 82.6 + / - 23.4%, to 72 + 18% と な り, GFP positive cells は lung, liver, small intestine, kidney, Cui の や interstitial に network department to recognize め ら れ た. The に膵 island regenerates モデ た を ち ち て検 て検 て検 to seek た. Written キ メ ラ マ ウ ス に Cui island の 壊, renewable が induced さ れ る 200 mg/kg の streptozotocin (STZ) cast and し そ を の after 1 yard, 3, 7 eyes に Cui viscera を pick the し, frozen section, 蛍 顕 light microscopically に beg し 検 た. Cast and after 1 eye の organization で は beta cells は the し く handicap of さ れ, Cui island に endocrine particles (イ ン ス リ ン) の released as が み ら れ た が, 3 eyes に は や re-grow like が み ら れ, a の Cui island で は に nearly normal を い form shown し た. Hyperglycemia affects く and the number of 膵 islands 膵. It reduces く た. PCNA positive cells は 1 eye の Cui island お よ び Cui epithelial に く recognize め, そ の の after 3 yard, 7 を も positive cells to recognize め た. 1 eye に は Cui island に most の を GFP positive cells to recognize め た が, shape of に は infiltrating し た inflammatory cells と think わ れ た. On the 3rd day, the number of で, そ and そ <s:1> decreased by た. The <s:1>, <s:1> スリ スリ <e:1>, <s:1> chromogenic を holding of cells で, で な った った. こ の regeneration induced condition で は fully な Cui island の regeneration induced で が き な い の で, in the future, hyperglycemia の 続 に よ る beta cells の handicap of を except き Cui island regeneration を さ ら に long-term に 継 続 で き る モ デ ル で の be 験, す な わ ち に after STZ cast and normalization of blood glucose を さ せ る homologous Cui island transplantation モ デ ル で の beg を 検 project し て い る.

项目成果

Kimura F, Gotoh M, Tanaka T, Luo Z, Miyazaki J, Uede T, Monden M, Miyasaka M: "Locally expressed CTLA4-Ig in a pancreatic beta cell line suppresses accelerated graft rejection response induced by donor-specific transfusion"Diabetologia. (in press).

Kimura F、Gotoh M、Tanaka T、Luo Z、Miyazaki J、Uede T、Monden M、Miyasaka M：“胰腺 β 细胞系中局部表达的 CTLA4-Ig 抑制供体特异性输血诱导的加速移植物排斥反应”Diabetologia。

Kimura F, Gotoh M, Tanaka T, Luo Z, Miyazaki J, Monden M, Uede T, Miyasaka M.: "Effects of locally expressed CTLA4-Ig in a pancreatic beta cell line on theaccelerated graft rejection response induced by DST"Transplant Proc. 33(1-2). 552 (2001)

Kimura F、Gotoh M、Tanaka T、Luo Z、Miyazaki J、Monden M、Uede T、Miyasaka M.：“胰腺 β 细胞系中局部表达的 CTLA4-Ig 对 DST 诱导的加速移植物排斥反应的影响”移植程序