Laser scanning cytometryを用いたmatrilysin発現と細胞増殖能との関連

激光扫描细胞术观察基质溶素表达与细胞增殖能力的关系

• 批准号: 02F00237
• 负责人: 佐々木 功典
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02F00237/
• 关键词: matrilysin; beta-catenin; ki-67; laser scanning cytometry; CGH; centrosome; Ets-1

我々は、免疫組織学的手法による癌の生物学的性状を評価した後、新しい研究手技-サイトメトリー(LSC)や分子細胞遺伝子学的解析技術(CGH)などを取り入れて、癌の生物学的性状とゲノムコピー数異常との関係を研究している。以下にそれらの詳細を報告する。1、免疫組織学的手法による癌の生物学的性状の評価我々は癌浸潤性と強く関連するmatrilysin発現が進行性胃がんの予後不良因子となることを証明してきた(論文はJournal of Japanese Cancer Researchに載っている)。さらに、matrilysinが癌浸潤の先端部に位置するがん細胞に強く発現しているが、それらの細胞自身には増殖能が低いことを初めて報告し、研究者から高く評価されている(論文はHuman Pathologyに載っている)。がん細胞におけるmatrilysin発現機構を明らかにするために、我々は"cell array"用スライドに載っている50種類の培養細胞によって、研究した。我々はこの"cell array"用スライドの上に毎個spotの中に一定数の一つ種類の培養細胞をのせて、多種類の抗体で別々に蛍光免疫染色をして、laser scanning cytometry(LSC)でそれぞれの蛋白発現量を測った。Matrilysin蛋白は50種類培養細胞の内に4種類の癌細胞に発現された。Ets-1蛋白は7種類の細胞に発現されたが、その中の4種類ともmatrilysinを発現された細胞である。この結果からEts-1 geneはmatrilysin発現のup-regulate geneであるかもしれないことが推測できる。この関係は臨床標本を使って、さらに証明する必要がある。だから、次に我々は臨床手術的に取った210例の胃がん標本の"tissue array"スライドを作成して、matrilysin、Ets-1とbeta-cateninの免疫染色をした。染色結果は検討中している。2、癌の分子細胞遺伝子学の研究当教室では、癌研究の一つ手法としての分子細胞遺伝子学的解析(LSC and CGH)を種種の癌に対して行っているが、私は大腸がんの生物学的性状とゲノム異常との関係を検討していた。これらの結果成果は二つの論文を投稿している。3、その他癌の生物学的性状がゲノム不安定性と関係しているとの考えから、中心体と細胞核DNA量の異常と関係についての研究をしていた。現時点で、臨床標本についての中心体を検出できる実験手順が完成して、70例ぐらいの症例の実験dataを観測した。

We have developed new techniques for the analysis of biological characteristics of cancer by immunohistological methods (LSC) and molecular cytogenetic analysis (CGH). The following is a detailed report. 1. Immunohistochemical methods were used to evaluate the biological characteristics of cancer and to prove the strong correlation between matrilysin and invasion of cancer (paper published in Journal of Japanese Cancer Research). In addition, matrilysin can be found in cells at the tip of cancer invasion, and the proliferation ability of cells themselves can be found in cells at low levels. When it comes to matrilysin discovery mechanisms in cells, I have been conducting research on 50 types of cultured cells contained in the "cell array" using a smartphone. We use the term "cell array" to detect a number of different types of cultured cells in each spot, to differentiate between multiple types of antibodies, to detect the amount of protein produced by light immunostaining, and laser scanning cytometry(LSC). Matrilysin protein was detected in 4 kinds of cancer cells out of 50 kinds of cultured cells. Ets-1 protein is expressed in 7 kinds of cells, and 4 kinds of matrilysin are expressed in cells. The result is that the Ets-1 gene is matrilysin and the up-regulate gene appears. This relationship is necessary for clinical application and certification. The "tissue array" of 210 cases of gastric cancer was prepared by immunostaining with matrilysin, Ets-1 and beta-catenin. The staining results are negative. 2. The molecular cytogenetics of cancer is studied in the classroom, and the molecular cytogenetics analysis (LSC and CGH) of cancer research is discussed in the relationship between various biological characteristics of cancer and abnormality. The results of this paper are published in two papers. 3. The relationship between centrosome instability and nuclear DNA quantity is studied in biological characteristics of other cancers. At present, the central body of clinical patients is detected, and the clinical data of 70 cases is measured.

项目成果

Xiu-ping Liu: "Inverse relationship between matrilysin expression and proliferative activity of cells in advanced gastric carcinoma"Human Pathology. 33,7. 741-747 (2002)

刘秀平：“晚期胃癌中基质溶解素表达与细胞增殖活性的负相关”《人类病理学》。

Xiu-ping Liu: "Prognostic significance of matrix metalloproteinase-7 (MMP-7) at the invasive front in gastric carcinoma"Journal of Japanese Cancer Research. 93,2. 291-295 (2002)

刘秀平：“基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在胃癌侵袭前沿的预后意义”日本癌症研究杂志。