ラミニンα4鎖G領域のヘパリン結合領域の解析

层粘连蛋白α4链G区肝素结合区分析

• 批准号: 02J05360
• 负责人: 山下 泰恒
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J05360/
• 关键词: 細胞外マトリックス; ラミニン; ヘパリン

1.サブ領域G4のどのアミノ酸がヘパリン結合活性に影響を与えるか?一年目から継続して行なったサブ領域G4内のヘパリン結合に関与するアミノ酸を部位突然変異法により探索し、申請者は四つのアミノ酸R1520,K1531,K1533,K1539が結合に関与するという結果を得た(Yamashita et al.,J Mol Biol,2004)。2.サブ領域G4〜5の三次元構造の解析一年目から継続して行なったサブ領域G4-5の三次元構造解析は、解析に最適な結晶を得る事ができなかった。3.生体内にヘパリン結合性ラミニンα4鎖G領域分解産物は存在するか?大量にマウス血清を採取できなかったという問題点も残るが、申請者らが解析した結果ではマウス血清中にラミニンα4鎖G領域分解産物は存在していなかった。4.高ヘパリン結合性ラミニンα4鎖G領域が癌細胞の浸潤・転移にもたらす影響の解析申請者は、ラミニンα4鎖G領域を構成するサブ領域G1からG5をGST融合蛋白として作製しHuman fibrosarcoma HT1080細胞への接着を解析した。その結果、G4にのみ強い細胞接着活性が存在し、その結合はヘパリン添加、細胞のヘパリチナーゼ酵素処理により激減した。また、G4に結合する細胞受容体を解析した結果、ヘパラン硫酸プロテオグリカンの一つであるシンデカン-4であるという結果を得た(現在、投稿中)。

1. What is the influence of the binding activity of Sino-G4 のどのアミノ acid がヘパリン and えるか? The から継続して行なったサブregion G4's のヘパリン combined に关 and するアミノ acid を parts The sudden change of the method of exploration, the applicant's four つのアミノ acid R1520, K1531, K1533, K1539 and the combination of にSeki and するという results を got た (Yamashita et al., J Mol Biol, 2004). 2. Analysis of the three-dimensional structure of the fields G4 to 5. One-year analysis of the three-dimensional structure of the fields G4-5. 3. Is there any decomposition product of にヘパリン binding ラミニンα4 lock G domain in the body? Is it possible to take a large amount of にマウス serum? As a result of the analysis of the problem point and the applicant's analysis, it was found that the decomposition product of the alpha 4-lock G domain in the serum of the applicant was found. 4. Applicants for analysis of the impact of high-density lipoprotein α4-locking G domain on cancer cell infiltration and migration , ラミニンα4 lock G domain を composition するサブ domain G1 からG5 をGST fusion protein として produced しHuman The fibrosarcoma HT1080 cells were then analyzed. As a result, the G4 strong cell activity was present, the combination was added, and the cell enzyme treatment was significantly reduced.また、G4 binding する cell receptor analysis results した、ヘパランsulfate プロテオグリカンの一つであるシンデカン-4であるというRESULTSを得た (currently, being submitted).