RFPのエピジェネティックな転写制御機能の解析と発生・分化および発癌との関連

RFP表观遗传转录调控功能及其与发育、分化、癌变的关系分析

• 批准号: 02J05335
• 负责人: 下野 洋平
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J05335/
• 关键词: RET finger protein; PIAS; SUMO; Mi-2β; 核小体; 転写制御; エピジェネティクス; MCRS1; Enhancer of Pelycomb 1; Mi-2; BRG1; 精巣腫瘍; Enhancer of Polycomb 1

本研究の目的は、RET finger protein(RFP)を含む核内蛋白複合体によるエピジェネティックな転写制御メカニズムが、発生・分化および腫瘍形成に果たす役割を明らかにすることにある。これまでの検討でRFP結合蛋白としてEnhancer of Polycomb 1(EPC1)及びクロマチンリモデリング蛋白Mi-2βを同定し解析した。精巣ではRFPの0-グリコシル化修飾がEPCとの結合に重要である事を示し、ヒト精巣腫瘍では、RFPの発現がセミノーマ及びそのコンポーネントをもつ腫瘍に特異的に高いことを示した。本年度は、RFPの結合蛋白として、PIASファミリー蛋白と核小体蛋白MCRS1に注目し解析した。PIASは近年SUMO化修飾のE3酵素であることが示されている。酵母two-hybrid法および免疫沈降法による検討で、RFPはPIASのPIAS1,3,x, yの全てのサブタイプと結合することが分かった。さらに、PIASはRFPをSUMO化して、RFPの核内局在を変化させ、転写抑制能を増強することが判明した。また、精巣では精母細胞内でRFPとSUMO-1が特徴的なキャップ構造内に共存することが分かった。以上の検討から、RFPのSUMO化は、転写活性および核内局在の制御に関与し、生理的には精子形成過程で働く可能性が示された。核小体蛋白MCRS1は、EPC1のEPcAドメイン結合蛋白のスクリーニング過程で同定された。今回は、免疫沈降法と酵母two-hybrid法により、MCRS1がMi-2βおよびRFPと結合することを同定した。共焦点レーザー顕微鏡により、核蛋白であるRFPおよびMi-2は核小体にも局在し、MCRS1とも共存することを示した。また、MCRS1、Mi-2βおよびRFPはリボソーマルRNAのプロモーター領域に対して強い転写活性化能を示し、siRNAによる発現抑制によりリボソーマルRNAの産生を低下させた。以上の検討から、核内で転写抑制に働くRFPやMi-2βは、核小体ではリボソーマルRNA転写を活性化し細胞増殖に寄与している可能性が考えられた。

In this study, RET finger protein (RFP) contains the complex of nuclear protein, which contains the complex of nuclear protein, the system of writing, the formation of differentiation and differentiation, and the formation of fruit cuttings. The RFP binding protein, Enhancer of Polycomb 1 (EPC1), and the protein Mi-2 β, which were identical to each other, were identified. This is the best way to improve the quality of the RFP. This is the combination of the EPC and the important information, and the RFP shows that the information is not correct and that the information is special. This year, RFP binding protein, PIAS protein, nucleosome protein, MCRS1, nucleosome protein, nucleosome protein and nucleosome protein. In recent years, PIAS chemical modification of E3 enzymes has shown that there is a significant increase in the number of enzymes. Yeast two-hybrid method, immuno-sedimentation method, RFP-PIAS-PIAS1,3,x, y-Elisa combined with immunoprecipitation assay were used. In general, PIASS, RFPOS, RFP, and write suppression can enhance the accuracy of recognition. The cytoplasm of the spermatozoa of RFPPAS sumo-1 is characterized by endogenesis, coexistence, and differentiation. The above tests, RFP SUMO, and activity tests show that the possibility of spermatogenesis is important in the process of spermatogenesis. The binding process of nucleosome protein MCRS1 and EPC1 EPcAbs was the same as that of EPC1EPC1EPcAbs. This time, immunoprecipitation method, yeast two-hybrid method, MCRS1 Mi-2 β-protein RFP assay and immunoprecipitation method were used to determine the same concentration. Confocal microspheres, nucleoproteins, RFP, Mi-2, nucleosome, MCRS1, coexistence, nucleosome, nucleosome. RNA, MCRS1, Mi-2 β, RFP, and so on. In the field of writing, the activity of writing is enhanced, and the activity of writing is strongly indicated. The inhibition is detected. The RNA is used to produce low levels of activity. Above, intranuclear writing inhibition (RFPMI-2 β), nucleosome (nucleosome), nucleosome (Mi-2 β), nucleosome (nucleosome), nucleosome, nucleosome, nucleosome

项目成果

Tezel G et al.: "Differential expression of RET finger protein in testicular germ cell tumors"Pathology International. 52・10. 623-627 (2002)

Tezel G等：“睾丸生殖细胞肿瘤中RET指蛋白的差异表达”病理学国际52·10（2002）。