再生医療を目指したヒト肝幹細胞の分離・同定と機能解析

用于再生医学的人肝干细胞的分离、鉴定和功能分析

• 批准号: 02J06129
• 负责人: 鈴木 淳史
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J06129/
• 关键词: 幹細胞; 肝臓; 肝細胞; 膵臓; 膵β細胞; 再生医学; 分化; フローサイトメトリー

培養の難しいヒト肝幹細胞の培養法を確立するために、これまでマウス肝幹細胞の増殖・分化機構を詳細に解析してきた。昨年、肝幹細胞から肝細胞へと分化する初期段階に肝細胞成長因子(HGF)が、その後の分化成熟段階にオンコスタチンM(OSM)が重要な役割を果たしていることを解明したことで(Suzuki et al. Development,2003)、ヒト細胞の前段階としてサル胎児肝臓細胞の培養系の改良を行った。その結果、肝幹・前駆細胞の分裂と増殖を認め、効率よくコロニー形成を誘導することに成功した。さらに、それらの細胞の中に肝細胞や胆管上皮細胞の分化マーカーの発現を認めた。しかしながら、マウス肝幹細胞に見られるような長期的な細胞分裂と継続した分化細胞の供給の実現には至らなかった。これらの幹細胞としての特徴は、移植に必要な肝臓細胞を生体外で幹細胞から作り出すといった再生医療の実現に向けた必要課題である。培養系をさらに改良すると共に、フローサイトメトリーによる幹・前駆細胞の濃縮を進めることで、霊長類肝幹細胞の長期培養の実現に向けた研究を進めるつもりである。これまでの我々の解析から、肝臓・膵臓・腸の幹細胞はお互いに別の臓器の構成細胞を生み出しうることが示唆されていた。そこで、マウス肝幹細胞からの膵β細胞分化誘導を目的とした研究と同時に、腸管幹細胞からの膵β細胞分化誘導を比較検討してみた。すると、分化誘導因子として使用したglucagon-like peptide-1(GLP-1)が、腸管細胞にインスリン発現を誘導しうることが判明した(Suzuki et al. PNAS,2003)。現在、GLP-1が肝幹細胞や膵幹細胞に対しても同様にインスリン発現誘導能を有するか否かを解析中である。本研究を遂行するに当たり、平成15年4月から平成16年3月まで米国ソーク研究所にて研究を行った。

Culture of liver stem cells is difficult to establish, and the mechanism of proliferation and differentiation of liver stem cells is analyzed in detail In the past year, hepatocyte growth factor (HGF) has been found in the early stages of differentiation of liver stem cells, and in the mature stages of differentiation of liver stem cells (OSM) has been found to be an important factor in the differentiation of liver stem cells (Suzuki et al. Development,2003). As a result, the proliferation of liver stem cells was successfully induced. The differentiation of liver cells and bile duct epithelial cells in the middle of the liver and bile duct is recognized. The liver stem cells are divided into two parts, i.e., they are divided into three parts, i.e., they are divided into two parts, they are divided into three parts, i.e., they are divided The characteristics of stem cells are necessary for transplantation. Stem cells in vitro are necessary for regenerative medicine. The development of culture system improvement, stem cell concentration and long-term culture of liver stem cells The stem cells of the liver, intestine and kidney are expressed in the cells that constitute the organ. Objective: To study the induction of differentiation of liver stem cells and intestinal stem cells. The use of glucagon-like peptide-1(GLP-1) as a differentiation-inducing factor has been identified for induction of cell differentiation in intestinal cells (Suzuki et al. PNAS,2003). Now, GLP-1 has been found in liver stem cells and liver stem cells. This research was carried out at the U.S. Haoke Research Institute from April 2015 to March 2016.

项目成果

鈴木淳史: "Identification and propagation of liver stem cells"Semin Cell Dev Biol (Review). 13(6). 455-461 (2002)

Atsushi Suzuki：“肝脏干细胞的鉴定和繁殖”Semin Cell Dev Biol（评论）13（6）（2002）。

鈴木淳史: "Role for growth factors and extracellular matrix in controlling differentiation of prospectively isolated hepatic stem cells"Development. (in press).

Atsushi Suzuki：“生长因子和细胞外基质在控制预期分离的肝干细胞分化中的作用”（正在出版）。

鈴木淳史: "Establishment of clonal colony-forming assay system for pancreatic stem/progenitor cells"Cell Transplantation. 11(5). 451-453 (2002)

Atsushi Suzuki：“胰腺干细胞/祖细胞克隆集落形成测定系统的建立”细胞移植11（5）（2002）。

鈴木淳史: "Role for growth factors and extracellular matrix in controlling differentiation of prospectively isolated hepatic stem cells."Development. 130. 2513-2524 (2003)

Atsushi Suzuki：“生长因子和细胞外基质在控制预期分离的肝干细胞分化中的作用。”开发。130. 2513-2524 (2003)。

鈴木淳史: "Liver repopulation by c-Met-positive stem/progenitor cells isolated from the developing rat liver"Hepato-Gastroenterology. (in press).

Atsushi Suzuki：“从发育中的大鼠肝脏中分离出 c-Met 阳性干细胞/祖细胞进行肝脏再增殖”肝胃肠病学（正在出版）。