小児Malignant Rhabdoid Tumorの細胞生物学的特性について

关于小儿恶性横纹肌样瘤的细胞生物学特性

基本信息

批准号：
10770345
负责人：
鈴木淳史
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Shiga University of Medical Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

悪性横紋筋様腫瘍(Malignant rhabdoid tumor、以下MRTと略す)の細胞株を用いて、増殖因子およびその受容体について調べ、そのオートクラインの詳細な特性を検討した。方法は5つの培養細胞株(TM87-16,STM91-01,TTC549,TTC642,YAM-RT)を使用し、RT-PCRによりtransformation growth factorα(TGF-α),epidermal growth factor(EGF),及びepidermal growth factor receptor(EGFR)のmRNAの発現について検索した。また、TPAによる分化誘導後にそれぞれのmRNAの定量をcompetitive PCRにて行なった.さらに、TGF-α,EGF,EGFR抗体の添加による細胞培養で細胞増殖を検討した。結果は5株のうちTM87-16,STM91-01,TTC549,TTC642の4株はTGF-α/EGFRオートクラインであり、分化誘導によりTGF-αmRNAのdown regulationを認めた。YAMRTの1株はEGF/EGFRオートクラインであり、EGFmRNAのdown regulationを認めた。しかしTTC549の1株は分化誘導によりTGF-αmRNAのdown regulationを認めたが同時にEGFmRNAの発現をも認めた。抗体添加による細胞培養ではTM87-16,STM91-01,TTC642の3株ではTGF-α抗体により著明な増殖抑制が認められた。同様にYAMRTの1株ではEGF抗体により著明な増殖抑制が認められた。これに対してTTC549ではTGF-α抗体では増殖抑制が認めず、TGF-α、EGF抗体の両方の添加によりはじめて増殖抑制が認められた.以上の結果より、MRT細胞株においてはTGF-α/EGFRまたはEGF/EGFRの2つの型のオートクライン機構が存在していること、TTC549の1株はTGF-α/EGFRまたはEGF/EGFRの二重支配により制御されていることが示唆された。

使用细胞系进行了生长因子及其受体，用于恶性胸腺肿瘤（以下简称缩写为MRT），并检查了其自分泌的详细特征。该方法使用五种培养的细胞系（TM87-16，STM91-01，TTC549，TTC642和YAM-RT）来搜索转化生长因子α（TGF-α），表皮生长因子（EGF）和表皮生长因子受体（EGFR）的mRNA表达。此外，在通过TPA诱导分化后，通过竞争性PCR定量各自的mRNA。此外，通过添加TGF-α，EGF和EGFR抗体，通过细胞培养检查细胞增殖。结果表明，在五种菌株中，TM87-16，STM91-01，TTC549和TTC642是TGF-α/EGFR载量，通过诱导分化观察到TGF-αmRNA的调节。 YAMRT的一种菌株是EGF/EGFR自动线，观察到EGF mRNA的下调。然而，一种TTC549菌株通过诱导分化显示了TGF-αMRNA的调节，但也显示出EGF mRNA的表达。在添加抗体的细胞培养中，在三种菌株中观察到显着的生长抑制作用：TM87-16，STM91-01和TTC642带有TGF-α抗体。同样，在一种YAMT菌株中，EGF抗体观察到了显着的生长抑制作用。相反，TTC549没有抑制TGF-α抗体的生长，并且仅通过添加TGF-α和EGF抗体抑制了生长。这些结果表明，MRT细胞系TGF-α/EGFR或EGF/EGFR中存在两种类型的自分泌机制，并且TTC549的一种菌株受TGF-α/EGFR或EGF/EGFR的双重支配。