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ショウジョウバエlola遺伝子産物の構造的・機能的多様性

果蝇 lola 基因产物的结构和功能多样性

基本信息

批准号：
02J61457
负责人：
堀内貴之
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tokyo Metropolitan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

ショウジョウバエlola遺伝子は胚期における中枢および末梢神経系の形成、とくに神経軸索の正確な投射に必須な遺伝子である。本研究計画ではlola遺伝子の発現制御解析および機能解析に焦点を絞った。まず、cDNA解析によりlola遺伝子のエキソン・イントロン構造をあきらかにした。その結果、lola遺伝子は32個のエキソンから構成される巨大かつ複雑な遺伝子で、選択的スプライシングにより80種以上のmRNAアイソフォームを生じることがわかった。定常領域はタンパク間相互作用に働くBTBドメインをコードしておりく可変領域はDNA結合に関わるZnフィンガーモチーフをコードする。すなわち、20種以上のBTB/Znフィンガー型転写因子アイソフォームを産生する。RNA in situハイブリダイゼーションおよび定量的PCR解析の結果、lolaの発現がアイソフォームレベルで時空的に厳密に制御されていることがあきらかになった。また、アイソフォーム単位での機能解析の結果、夫々のアイソソフォームが機能的にも夫々に特化していることが考えられた。lola遺伝子が適切に機能するためには、選択的スプライシングの制御が適切でなければならない。選択的スプライシングの制御システムを詳細に解析したところ、lolaでは二通りのスプライシングシステム、すなわち選択的シススプライシングと選択的トランススプライシングが採用されていることがわかった。この発見は、エキソンが同方向に配向する一般的な遺伝子座においては初めてのことである。また、定常領域と可変領域は同一遺伝子座内に存在するにもかかわらず独立の転写単位として発現しているとうこともあきらかにした。

The formation of the central nervous system in the embryonic stage and the correct projection of the axonal system in the embryonic stage are necessary. This research project focuses on the focus of the current control analysis and functional analysis.まず, cDNA analysis によりりらかにしたのエキソン・イントロン structure.その results, lola 伝子は 32 pieces of のエキソンから constitute a huge される huge かつ complex 雑な伝子で, selection択的スプライシングによりMore than 80 kinds of mRNAアイソフォームを生じることがわかった. The interaction between the stationary field and the space between themく変区はDNA Blend に关るるZnフィンガーモチーフをコードする.すなわち, more than 20 kinds of のBTB/Znフィンガー type 転WRITE factor アイソフォームをproduces する. RNA in The result of quantitative PCR analysis of situハイブリダイゼーションおよび, the appearance of lolaがアイソフォームレベルでに厳米にcontrol されていることがあきらかになった.また、アイソフォーム単での Functional analysis results, husband 々のアイソThe function of the ソフォームがにも夫々にSpecialized していることが考えられた. lola's leftover ががにするためには, スプライシングの control が色でなければならない of the selected one. Selected スプライシングのcontrol システムを detailed analysis したところ, lola では二通りのスプライシングシステム.ンススプライシングが adopts されていることがわかった. The この発见は and the エキソンが are in the same direction and are aligned with the するgeneral な伝子恫おいては初めてのことである.また, the constant field and the changeable field exist in the same zodiac.らず independent の転write 単bit として発成しているとうこともあきらかにした.