哺乳動物におけるインフルエンザウイルスの病原性獲得機構の解明

阐明流感病毒在哺乳动物中获得致病性的机制

• 批准号: 13760219
• 负责人: 五藤 秀男
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13760219/
• 关键词: インフルエンザウイルス; 病原性; リバース・ジェネティクス; プラスミノーゲン

ヒト由来のインフルエンザウイルスA/WSN/33株の糖蛋白質ノイラミニダーゼ(NA)は生体内に広く分布するプラスミノーゲンをプラスミンに活性化する。プラスミンは、もう一つのウイルス糖蛋白質である赤血球凝集素(HA)を開裂してウイルスの感染性を増強する。プラスミノーゲンは、NAのカルボキシル末端リシン残基を介して結合することにより活性化される。また、NA146番目のアミノ酸に付加する糖鎖は立体構造上カルボキシル末端リシン残基の近傍に位置し、NAとプラスミノーゲンの結合を阻害することがわかっている。本研究では、糖鎖欠損という単純な機構でインフルエンザウイルスは強い病原性を獲得できるか否かを調べる。本年度はA/WSN/33株と同じくカルボキシル末端にリシン残基を持つA/Puerto Rico/8/34株のNAを用い146番目の糖鎖欠損変異NAを作製し、リバース・ジェネティクス法で組換えウイルスを合成した。前年度合成したA/WS/33株の糖鎖欠損変異NAを持つ組換えウイルスとともに、それらの生物活性を検討した結果、以下の結果を得た。(1)146番の糖鎖付加はNAの合成、細胞内輸送、そしてシアリダーゼ活性に不可欠ではなかった。(2)糖鎖欠損によりA/WS/33株のNAはプラスミノーゲンを活性化できるようになったが、A/Puerto Rico/8/34株のNAは糖鎖の有無に関係なくプラスミノーゲンを活性化できなかった。(3)A/WS/33株の糖鎖欠損変異NAを持つ組換えウイルスは、感染性が増強されなかった。以上の結果より、カルボキシル末端リシン残基を持つNAは潜在的にプラスミノーゲンを活性化する機能を持つわけではなく、さらにNAによりプラスミノーゲンが活性化された場合でも、ウイルスの病原性は必ずしも増強されないことが明らかとなった。すなわち、インフルエンザウイルスの病原性獲得には糖鎖欠損に加え、さらにほかの要因が必要である。

The glycoproteins of strain A/WSN/33 are distributed in vivo and activated. The presence of hemagglutinin (HA) increases the infectivity of the virus. The amino acid residues in the terminal amino acid residues of NA are activated by binding to the amino acid residues. The position of the terminal residue in the stereostructure of the sugar chain is close to that of the amino acid sequence of NA146, and the binding of NA 146 is blocked. In this study, the mechanism of sugar lock deficiency was studied. This year, the A/WSN/33 strain has the same residue at the end of the gene chain. The A/Puerto Rico/8/34 strain has the same residue at the end of the gene chain. A/WS/33 strain was synthesized in the previous year, and the results of the biological activity analysis were obtained. (1) The synthesis, intracellular transport, and activity of 146-part glycophosphorin are essential. (2)A/WS/33 strain of NA is activated by the presence or absence of sugar lock. A/Puerto Rico/8/34 strain of NA is activated by the presence or absence of sugar lock. (3)A/WS/33 The sugar lock of the plant is not damaged, and the infection is increased. As a result, the presence of terminal residues in the RNA is a potential source of activity, and the pathogenicity of the RNA must be increased in the presence of active residues. The pathogenicity of the virus is necessary to increase the damage caused by sugar lock.

项目成果

白石京子 他: "抗インフルエンザ治療薬の問題点-理論的考察"インフルエンザ. 3・3. 201-207 (2002)

Kyoko Shiraishi 等人：“抗流感药物的问题 - 理论考虑” 流感 3・3（2002）。

Shiraishi K et al.: "High Frequency of Resistant Viruses Harboring Different Mutations in Amantadine Treated Children with Influenza"J. Infect Dis.. (発表予定).

Shiraishi K 等人：“金刚烷胺治疗的流感儿童中存在不同突变的高频率耐药病毒”J. Infect Dis..（即将出版）。

堀本泰介 他: "ウイルスの病原性発現における糖タンパク質の役割"Molecular Medicine. 39. 212-226 (2003)

Taisuke Horimoto 等人：“糖蛋白在病毒致病性表达中的作用”《分子医学》39. 212-226 (2003)。

Fujii Y et al.: "Selective incorporation of influenza virus RNA segments into virions"Proc.Natl.Acad.Sci. USA.. 100・4. 2002-2007 (2002)

Fujii Y等人：“将流感病毒RNA片段选择性掺入病毒颗粒”Proc.Natl.Acad.Sci USA.. 100・2007 (2002)。

Ito T, et al.: "Generation of a highly pathogenic avian influenza A virus from an avirulent field isolate by passaging in chickens"J Virol.. 75・9. 4439-4443 (2001)

Ito T 等人：“从无毒力的野外分离物中通过鸡传播产生高致病性禽流感 A 病毒”J Virol.. 75・9（2001 年）。