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ヒト有機アニオントランスポーターhOAT1におけるプロモーター解析

人有机阴离子转运蛋白hOAT1的启动子分析

基本信息

批准号：
13770048
负责人：
細山田真
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyorin University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770048/
关键词：
マウスOAT1 プロモーター CD4^+細胞ゲルシフトアッセイ

项目摘要

(1)マウス腎臓核タンパクと結合するDNA配列の探索まず交付申請書に示したようにフットプリント法でマウス腎臓核タンパクが結合するDNA配列を決定することを試みたが、はっきりとしたフットプリントは得られず、この方法を断念した。別の方法としてレポータージーンアッセイ法があるので分泌型アルカリホスファターゼをレポータージーンとして種々の長さのプロモーター領域を含むコンストラクトを作成した。しかしhOAT1を内因性に発現している細胞が必要であったので、RT-PCR法を用いてスクリーニングを行ったところ、ConA活性化ヒトCD4^+細胞で転写がみとめられることを明らかにすることが出来た。しかしT細胞由来細胞株では転写発現を認めなかった。したがって浮遊細胞でもあり、有効な遺伝子導入を行うことができなかった。(2)今後の方針もともと腎臓の形質を維持した細胞株は得られにくく、特にトランスポーターを内因性に発現している腎臓由来の細胞株が存在しないので、腎臓におけるプロモーター解析は皆無であった。しかし近年トランスジェニックマウスを作成することによりプロモーター領域を内含するDNA配列を示すことができるようになっており、複数の報告がある。今後hOAT1、hURAT1のような腎臓特異的なトランスポーターの遺伝子についてトランジェニックマウスを作成することにより転写機構を解明する方針である。

(1) to determine the accuracy and accuracy of the DNA configuration, the application for delivery is displayed, the application for delivery is displayed, the method is displayed, and the method is determined. Other methods are as follows: in the field of environmental protection, there are significant differences in the field of environmental protection in the field of environmental protection. Due to the internal causes of hOAT1, it is necessary to use the RT-PCR method to activate the CD4 ^ + cells and write the data in the RT-PCR method. The origin of the cell, the cell line, the cell, the cell. Please tell me that there is a lot of money in the cell, and there is a child in the line. (2) in the future, there are significant changes in the maintenance of cell lines, especially in the presence of internal causes, the existence of bacterial strains, and the analysis of cell lines. In recent years, there has been an increase in the number of copies of reports in the field of DNA allocation, which is displayed in the field. From now on, the hOAT1, hURAT1 system and special information system will be used in the future. In the future, the information system of the system will be completed.