腎特異性グルタミン酸トランスポーターの遺伝子クローニングと機能特性

肾脏特异性谷氨酸转运蛋白的基因克隆和功能表征

• 批准号: 09770066
• 负责人: 細山田 真
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770066/
• 关键词: トランスポーター; 中性アミノ酸; cDNAクローニング; ASCT2; ラット

前年度の研究によってクローニングされたラット中性アミノ酸トランスポーター rASCT2のcDNAをプローブとして用いて、Northern blottingによるrASCT2の臓器分布の解析を行った。rASCT2のmRNAは2.7kbの単一バンドとして肺、骨格筋、大腸で発現を強く認め、腎臓、小腸,心臓、眼球において弱い発現を認めたが、精巣には発現を認めなかった。次に予想アミノ酸配列から14ペプチドを合成し、KLHを結合させた後にウサギに免疫してrASCT2を認識する抗ペプチド抗体を作成した。この抗体を用いて免疫組織化学染色を行った。その結果rASCT2はラットの腎臓において遠位尿細管から皮質集合管の一部の細胞の管腔側に発現することが示された。ラットの小腸及び大腸では、上皮細胞管腔側に発現を認めた。以上からrASCT2は小腸及び大腸において腸管管腔内のアミノ酸を吸収し、腎臓において遠位尿細管に到達したアミノ酸を再吸収するはたらきをしていると考えられた。

The analysis of rASCT2 cDNA by Northern blotting was carried out in the previous year. rASCT2 mRNA is 2.7kb in length and is expressed in lung, bone, muscle, large intestine, kidney, small intestine, heart, and eyeball. The next step is to prepare an anti-tumor antibody for the first time in the first place. Immunohistochemical staining was performed with the antibody. The results showed that rASCT2 was found in the distal urinary tubules of the kidney and in the luminal side of a part of the cortical collecting duct. The small intestine and large intestine were found on the luminal side of epithelial cells. The above is the case for the small intestine and the large intestine, and the kidney is the case for the distal urinary tubules.