IL-18による破骨細胞の骨収吸抑制の分子機構の解明

IL-18抑制破骨细胞骨吸收的分子机制阐明

• 批准号: 13770117
• 负责人: 山田 直子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770117/
• 关键词: 破骨細胞; IL-18; Differential Display; 骨吸収活性; RANKL; in vitro; マウス; インターロイキン18; インターロイキン12; 骨吸収

これまでに、IL-18が破骨細胞に直接作用し、骨吸収活性を抑制することを明らかにした。しかしその分子機構は明らかにされていない。そこで本研究は、IL-18が破骨細胞の骨吸収活性を抑制するメカニズムを解明することを目的とした。具体的には、IL-18が骨吸収活性を抑制する際に破骨細胞において発現量の変化する遺伝子をDifferential Display法により検索し、その遺伝子の制御機構を明らかにする。まずBALB/cマウスの骨髄細胞を破骨細胞分化因子(RANKL,25ng/ml)とマクロファージコロニー刺激因子(M-CSF,25ng/ml)を添加した培養液で4日間培養してin vitroで破骨細胞が分化する系を立ち上げた。その培養液中にIL-18(100ng/ml)を添加すると破骨細胞の分化と骨吸収能が抑制された。そこで培養液中にIL-18を添加した細胞としない細胞からRNAを回収してDifferential Displayを行った。mRNA FINGERPRINTING KIT(株式会社ニッポンジーン)を用いてDifferential Displayを行った結果、IL-18が作用して発現量の変化したバンドは136個確認できた。そのうちの121個のクローンについてシークエンス解析を行った結果、既知の遺伝子111個、未知の遺伝子10個を同定した。既知の遺伝子のうち破骨細胞に関連する遺伝は11個見つかった。この11個の遺伝子は破骨細胞の分化および骨吸収に関与することがわかっているが、IL-18との関連性は明らかにされていない。現在これらの遺伝子が、IL-18による破骨細胞分化抑制及び骨吸収抑制と直接関係するか否かを調べている。

IL-18 directly affects osteoclasts and inhibits bone resorption activity. The molecular structure of the compound is not clear. The aim of this study was to investigate the effects of IL-18 on bone resorption activity of osteoclasts. Specifically, IL-18 inhibits bone resorption activity, and changes the amount of osteoclast in vitro. Differential Display method is used to detect and control the amount of osteoclast in vitro. BALB/c osteoclast differentiation factor (RANKL,25ng/ml) and M-CSF (M-CSF,25ng/ml) were added to the culture medium and cultured in vitro for 4 days to establish osteoclast differentiation lines. Addition of IL-18(100ng/ml) to the culture medium inhibited osteoclast differentiation and bone resorption. IL-18 was added to the culture medium and RNA was recovered from the cells. mRNA FINGERPRINTING KIT(Inc.) uses Differential Display to determine the effect of IL-18 on the production of IL-18. The results of the analysis of 121 samples showed that 111 samples were known and 10 samples were unknown. 11 known osteoclast related genes These 11 genes are related to osteoclast differentiation and bone resorption, and IL-18 is related to osteoclast differentiation. The present study shows that IL-18 is directly related to osteoclast differentiation inhibition and bone resorption inhibition.

项目成果

N.Yamada et al.: "Interleukin-18 and Interleukin-12 Synergistically Inhibit Osteoclastic Bone-resorbing Activity"Bone. 30(6). 901-908 (2002)

N.Yamada 等人：“Interleukin-18 和 Interleukin-12 协同抑制破骨细胞骨吸收活性”Bone。

N.Yamada: "Interleukin-18 and Interleukin-12 Synergistically Inhibit Osteoclastic Bone-Resorbing Activity"Bone. (In press).

N.Yamada：“Interleukin-18 和 Interleukin-12 协同抑制破骨细胞骨吸收活性”Bone。