グラム陰性桿菌におけるメタロ-β-ラクタマーゼおよび基質拡張型β-ラクタマーゼ遺伝子の解析

革兰氏阴性杆菌中金属-β-内酰胺酶和底物延伸的β-内酰胺酶基因的分析

• 批准号: 13770141
• 负责人: 柴田 尚宏
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770141/
• 关键词: グラム陰性桿菌; メタロ-β-ラクタマーゼ; 基質拡張型β-ラクタマーゼ; 薬剤耐性菌; 院内感染; インテグロン; CTX-M β-ラクタマーゼ

クラス3型インテグロン構造に担われるメタロ-β-ラクタマーゼ産生株は我が国でしか検出されていない。臨床分離カルバペネム耐性セラチアAK9373株から全DNAを抽出し、クローニングに用いる。BamHIでクローニングした約7kbのblaIMP遺伝子を持つ組み換えプラスミドpSMB731をBamHIにてファージミドベクターに組み込み、deletionクローンを作成する。これを用いて塩基配列の解析を行ない、クラス3型インテグロンの全遺伝子構造を明らかにした。さらに遺伝子解析したインテグロン構造のヌクレオチドからプライマーを設計し、臨床分離メタロ-β-ラクタマーゼ産生株約900株からのスクリーニングを行ない、新たにP.putidaからクラス3型インテグロン構造を持つ株を発見した。さらに構造解析によってAK9373株や既存のクラス1型インテグロン構造とは異なる構造が明らかとなった。これらの中には院内感染を呈していると考えられるものもあり、臨床的にも重要と考えられた。また、基質拡張型β-ラクタマーゼ産生菌に関しては、我が国における検出状況を明らかとし、CTX-M-1型、CTX-M-2型、CTX-M-9型の3タイプの遺伝子型を持つものが多いことを明らかとした。さらにCTX-M-1型のグループでは、CTX-M-3型が多く、また、Toho-1型と考えられていた株はCTX-M-2型であることが初めて明らかとなった。PFGE解析により、医療施設によっては、こうした耐性菌が、院内感染を呈しているものもあった。これらを用い、欧米に多く検出されるTEM-,SHV-型とCTX-M-タイプβ-ラクタマーゼ産生菌を阻害剤を用いたディスク拡散法を用いて分別も可能であることも明らかとし、メタロ-β-ラクタマーゼ産生菌検出のメルカプト酢酸ナトリウムのディスクと組み合わせることにより、臨床現場での迅速な薬剤耐性菌の報告により正確に反映することがえきることが示唆される。

The structure of type 3 starfish is very important for the production of starfish. Clinical isolation of AK9373 strain from the whole DNA extraction, selection and use BamHI is a 7kb blaIMP gene that is used to construct the BamHI database. BamHI is used to construct the BamHI database and delete the BamHI database. The analysis of the matrix arrangement of the three types of molecules is now being carried out. In addition, the genetic analysis of the Kakura-Kakura-Kak The structure analysis of AK9373 strain and the existing structure analysis of AK9373 strain are as follows: The hospital infection is very serious. In addition, there are three types of β-rarefaction strains, CTX-M-1, CTX-M-2 and CTX-M-9, which are closely related to the production of β-rarefaction strains. CTX-M-1 type, CTX-M-3 type, Toho-1 type and CTX-M-2 type. PFGE analysis, medical facilities, resistant bacteria, hospital infection In this case, the TEM-, SHV-type, CTX-M-, β-, and β-, Rapid and accurate reporting of resistant bacteria in the clinical field

项目成果

Shibayama K, Doi H, Shibata N, Yagi T, Nada T, Iinuma Y, Arakawa Y.: "Apoptotic Signaling Pathway Activated by Helicobacter pylon Infection and Increase of Apoptosis-Inducing Activity under Serum-Starved Conditions"Infection and Immunity. 69(5). 3181-3189

Shibayama K、Doi H、Shibata N、Yagi T、Nada T、Iinuma Y、Arakawa Y.：“幽门螺杆菌感染激活细胞凋亡信号通路并在血清饥饿条件下增加细胞凋亡诱导活性”感染和免疫。

Doi Y, Shibata N, Shibayama K, Kamachi K, Kurokawa H, Yokoyama K, Yagi T, Arakawa Y.: "Characterization of a novel plasmid-mediated cephalosporinase (CMY-9) and its genetic environment in an Escherichia coli clinical isolate"Antimicrob Agents Chemother..

Doi Y、Shibata N、Shibayama K、Kamachi K、Kurokawa H、Yokoyama K、Yagi T、Arakawa Y.：“新型质粒介导的头孢菌素酶 (CMY-9) 及其在大肠杆菌临床分离株中的遗传环境的表征”

Shibayama K, Kamachi K, Nagata N, Yagi T, Nada T, Doi Y, Shibata N, Yokoyama K, Yamane K, Kato H, Iinuma Y, Arakawa Y.: "A novel apoptosis-inducing protein from Helicobacte' pylon"Mol Microbiol.. 47(2). 443-451 (2003)

Shibayama K、Kamachi K、Nagata N、Yagi T、Nada T、Doi Y、Shibata N、Yokoyama K、Yamane K、Kato H、Iinuma Y、Arakawa Y.：“一种来自螺杆菌的新型细胞凋亡诱导蛋白”Mol

杉野安輝, 柴田尚宏 他: "カルバペネム耐性Pseudomonas aeruginosaおよびAcinetobacter spp.における薬剤感受性とカルバペネム耐性機序の検討"日本感染症学雑誌. 75・8. 662-670 (2001)

Yasuteru Sugino、Naohiro Shibata 等：“碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌和不动杆菌属的药物敏感性和碳青霉烯类耐药机制的研究”75・8。

柴田 尚宏 他: "メタロ-β-ラクタマーゼ産生グラム陰性桿菌感染症"臨床検査. 45・8. 840-850 (2001)

Naohiro Shibata 等：“产生金属-β-内酰胺酶的革兰氏阴性杆菌感染”临床检查 45・8（2001）。