腸炎惹起時の全消化管平滑筋細胞における一酸化窒素合成酵素の発現変化とその制御機構

肠道炎症过程中胃肠道平滑肌细胞一氧化氮合酶表达变化及其调控机制

• 批准号: 13770264
• 负责人: 本村 廉明
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770264/
• 关键词: 一酸化窒素合成酵素; 消化管運動; 平滑筋細胞

我々はある種のペプチドホルモンがモルモット消化管平滑筋細胞内の一酸化窒素合成酵素(NOS)を介し平滑筋弛緩を惹起することを報告してきた。この平滑筋細胞内NOSに関して、消化管各部位からの新鮮単離平滑筋細胞標本を用いたノザンブロットによる検討では、内皮型NOS(eNOS)および神経型NOS(nNOS)mRNAが同時に発現し、部位によりそのバランスが異なっているという結果を得た。これはNOが比較的短時間の消化管平滑筋弛緩に働くことを考えると各部位の消化管運動の特徴ともよく一致しており、NOS発現量の違いが消化管の部位によって異なる運動に大きな役割を果たしていることを示唆している。そこで、(1)消化管各部位の平滑筋細胞内NOSの局在を明らかにするためeNOS、nNOSの特異的抗体を用い免疫染色を行った。また、(2)新鮮単離平滑筋細胞標本よりさらに純粋な標本を得るため消化管平滑筋細胞の初代培養系を作成し、NOSの発現をRT-PCR法にて確認した。(1)eNOSの免疫反応はモルモット胃、小腸、盲腸、大腸の平滑筋内に認められ、小腸で強い傾向にあった。これは前述のノザンブロットの結果とよく一致しており、小腸において平滑筋細胞内で合成されるNOがより重要な役割を果たしていることを示唆するものと考えている。nNOSの免疫反応は平滑筋では明らかでなく神経細胞に一致して認められた。(2)モルモット盲腸輪走平滑筋細胞の初代培養系を作成した。RT-PCR法によりeNOS、nNOS mRNAの発現を確認したところ、両方のmRNAとも発現していることを確認した。免疫染色では平滑筋にはeNOSのみ確認されたことから、定常状態において優位に発現し平滑筋弛緩に関わっているのはeNOSであり、nNOSは他の役割を担っているのではないかと考えている。今後さらなる検討が必要と思われる。`

We report that an enzyme called NOS mediates muscle relaxation in smooth muscle cells of digestive tract. The mRNA expression of NOS in smooth muscle cells, endothelial NOS(eNOS) and neuroNOS (nNOS) was detected simultaneously in all parts of the digestive tract. The characteristics of digestive tract movement in different parts of the digestive tract are consistent, and the amount of NOS occurrence is different. (1) NOS expression in smooth muscle cells of digestive tract was detected by immunostaining with eNOS and nNOS specific antibodies. (2) Establishment of primary culture system of smooth muscle cells from digestive tract and identification of NOS development by RT-PCR. (1) The immune response of eNOS tends to be stronger in the stomach, small intestine, caecum and large intestine. The results of this study are consistent with those of the small intestine, smooth muscle, and intracellular synthesis of NO. The immune response of nNOS is smooth and smooth. (2)The primary culture system of cecum smooth muscle cells was established. RT-PCR was used to confirm the expression of eNOS and nNOS mRNA. Immunostaining: smooth muscle, smooth muscle, smooth muscle relaxation, smooth muscle relaxation In the future, it is necessary to think about it.