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日本人アルツハイマー病に対するプレセニリン2遺伝子スプライシング多型の影響

早老素2基因剪接多态性对日本人阿尔茨海默病的影响

基本信息

批准号：
13770543
负责人：
山本泰司
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

今回はこの研究課題の2年目(最終年度)の報告である。前年度、われわれは孤発性アルツハイマー病とプレセニリン2遺伝子の新たなスプライシング多型の関連の先の報告(J. Neurochem.72,2498-,1999)に関して追試実験を行った。まず、RT-PCR法を用いて合成した末梢血(白血球)中RNA由来のcDNAをテンプレートにしてnested-PCR法をおこなったが、PCR産物の生成が不安定であった。その後、PCRの条件設定を変えて再挑戦したところ、ある程度の安定したPCR産物か得られるようになった。さらに、PCR産物を電気泳動したところ、予想外のサイスのバンドが複数(3ないし4本)出現したため、それぞれのPCR産物がどのような塩基配列であるかを確認することにした。そこでわれわれは次に、任意の症例を選びそれぞれのPCR産物をプラスミドベクターを用いてサブクローニングした後、プラスミドを精製し制限酵素処理をしたうえでシークエンスをおこなった。その結果、各バンドの塩基配列が判明した。その中には先の報告にあったプレセニリン2のエクソン5が完全に欠失しているものは存在せず、エクソン4のみが完全に欠失しているものが含まれていた。この結果は興味深い事実であった。この事実についてわれわれが考えたことは、脳内と末梢血ではプレセニリン2の遺伝子発現に差異があり、末梢では脳内とは異なるスプライシングが起こっているのではないかという推測であった。そこで文献を検索してみたところ、1996年〜1997年にかけて同様の実験結果に関して2,3の文献で報告されていることが判明した。しかし、エクソン4のみが完全に欠失したという報告はいまだないようであり、その結果をさらに解析してみる必要がありそうである。但し、末梢血でのプレセニリン2遺伝子のスプライシング多型の差異がそのまま脳内における発現の差異にあてはまるわけではないため、今後も充分な検討が必要と考える。

This time, the two-year (most recent year) report on the research project will be reviewed. In the previous year, the first report (J. Neurochem.72,2498-,1999) was used to track down the number of people who were sick. Using RT-PCR method to synthesize RNA in peripheral blood (white blood cells), the origin of RNA in peripheral blood (white blood cells), the formation of instability in peripheral blood (white blood cells), the formation of instability in peripheral blood (white blood cells), the synthesis of RNA in peripheral blood (white blood cells). After that, the PCR condition setting device should be selected again, and the degree of stability and stability of the PCR should be determined. The complex numbers (3-4 copies) of the PCR and PCR electrophoretic swimming tests are shown in the database, and the data of the PCR compounds are listed in the database to confirm the registration data. In any case, you should choose to use PCR to treat the disease. After using the drug, the enzyme restriction enzyme should be refined and purified. According to the results of the results, each of the two groups was assigned to identify the results. In the middle of the first report, there is a complete failure of the report in the middle of the report. The results showed that there was a deep taste of the incident. I don't know if there are any differences between the two groups. I don't know. I don't know. The results show that the results of the literature report and the report of the literature from 1996 to 1997 are very good. Please tell me that the report is not in full condition. The results show that it is necessary to make an analysis of the situation. However, there is no difference in the number of polymorphisms in the peripheral blood. In the future, it is necessary to make full use of the information.