ヒト臍帯血リンパ球および血球・血管前駆細胞の機能解析

人脐带血淋巴细胞和血细胞/血管祖细胞的功能分析

• 批准号: 13770620
• 负责人: 野村 明彦
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770620/
• 关键词: 臍帯血; 抑制性CD4T細胞; CD25分子; TREC; GITR; 血管内皮細胞; CD34陽性細胞; CD45分子; 抑制性T細胞; NK細胞; CD25; CD34細胞; IL-10; IL-18

A.臍帯血リンパ球に関する研究臍帯血CD25^+CD4^+T細胞について解析した。CD25^+CD4^+T細胞はヒトおよびマウスにおいて抑制性機能を有する細胞として報告されているが、われわれは臍帯血CD25^+CD4^+T細胞も抑制能を有しているにもかかわらず細胞表面上ナイーブT細胞の表現型を示していることを明らかにした。本年度さらに同細胞の特性を明確にするために、胸腺分化の指標であるT cell receptor excision circles (TREC)のmRNA発現およびマウス抑制性CD25^+CD4^+T細胞に特異的に発現し、抑制機能に関与していると報告された2分子(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor family-related(GITR) genesおよびFOXP3/Scurfin gene)についての臍帯血CD25^+CD4^+T細胞におけるmRNAの発現を調べた。TRECの発現は臍帯血膀帯血CD25^+CD4^+T細胞において、成人末梢血のCD25^+CD4^+T細胞やCD25^-CD4^+T細胞に比べ有意に高発現していた。このことは、臍帯血CD25^+CD4^+T細胞がTCRの再構成をした後ほとんど増加分裂していない、すなわちナイーブT細胞であることを直接的に示した。一方、CD25^+CD4^+T細胞におけるGITRの特異的な発現はみられなかった。このことから、臍帯血CD25陽性CD4陽性T細胞の抑制機能に対するGITR分子の関与は否定的であった。B.血球・血管前駆細胞に関する研究臍帯血CD34陽性細胞における血管内皮細胞への分化能を汎血球マーカーであるCD45分子陽性、陰性細胞間で比較した。血管内皮細胞へのin vitroでの誘導はフィブロネクチンコートしたプレート上にて増殖因子(VEGF,SCF,flt-3)添加によって行った。血管内皮細胞への分化が認められたのはCD45陰性細胞のみであった。この細胞群が血管内皮前駆細胞であるか浮遊している成熟血管内皮細胞であるかを結論づけるには至らなかったが、現在、より未熟な血管内皮前駆細胞はCD45陰性分画にあるとする報告が多いことから前駆細胞である可能性が十分示唆された。

A. Umbilical cord blood リ パ パ globocyte に related する study on umbilical cord blood CD25^+CD4^+T cells に た て て て analysis of た. CD25 + CD4 + T cells は ^ ^ ヒ ト お よ び マ ウ ス に お い て inhibitory function を have す る cells と し て report さ れ て い る が, わ れ わ れ は umbilical blood 帯 CD25 + CD4 + T cells も ^ ^ can inhibit を have し て い る に も か か わ ら ず cells on the surface of ナ イ ー ブ t-cell の phenotype を shown し て い る こ と を Ming ら か に し た . In this year, さらに with the characteristics of <s:1> cells を, にするために and the <s:1> indicator of thymus differentiation であるT cell receptor excision circles were identified (TREC) <s:1> mRNA occurrence および ウス ウス inhibitory CD25^+CD4^+T cells に specific に occurrence <s:1> inhibitory function に is related to <s:1> て ると ると ると report された2 molecules (glucocorticoid-induced tumor necrosis factor) family-related(GITR) genesおよびFOXP3/Scurfin gene に て て て におけるmRNA における of CD25^+CD4^+T cells in umbilical cord blood shows を regulation べた. TREC の 発 now は umbilical blood 帯 bang 帯 blood CD25 + CD4 + T cells に ^ ^ お い の て, adult peripheral blood CD25 + CD4 + T cells や ^ ^ CD25 ^ - CD4 + T cells に ^ is higher than べ intentionally に 発 now し て い た. こ の こ と は, umbilical blood 帯 CD25 + CD4 + T cells が ^ ^ TCR の reconstitution を し た after ほ と ん ど rights and split し て い な い, す な わ ち ナ イ ー ブ t-cell で あ る こ と を direct に shown し た. One side, CD25^+CD4^+T cells におけるGITR <s:1> specific な occurrence みられな みられな った った った. こ の こ と か ら, a positive positive umbilical blood 帯 CD25 CD4 T cells の inhibition function に す seaborne る GITR molecular の masato and は negative で あ っ た. B. cells, blood vessels, former 駆 に masato す る research umbilical blood 帯 CD34 positive cells に お け る endothelial cells へ の differentiation can を extensive blood マ ー カ ー で あ る CD45 molecules between positive and negative cells で compare し た. Induced endothelial cell へ の in vitro で の は フ ィ ブ ロ ネ ク チ ン コ ー ト し た プ レ ー ト on に て raised colonization factor (VEGF, SCF, PLT - 3) add に よ っ て line っ た. Vascular endothelial cells へ <s:1> differentiate が recognize められた <s:1> みであった CD45-negative cells <s:1> みであった. こ の cells が 駆 before vascular endothelial cell で あ る か planktonic し て い る mature endothelial cells で あ る か を conclusion づ け る に は to ら な か っ た が, now, よ り unripe な 駆 before vascular endothelial cell は CD45 negative points draw に あ る と す が る report more い こ と か ら 駆 cells before で あ が る possibility is sucking in さ れ た.

项目成果

Ohga S, Nomura A, et al.: "Epstein-Barr virus(EBV)load and cytokine gene expression in activated T cells of chronic active EBV infection"Journal of Infectious Disease. 183(1). 1-7 (2001)

Ohga S、Nomura A 等人：“慢性活动性 EBV 感染的活化 T 细胞中的 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 负载和细胞因子基因表达”传染病杂志。

Sasaki Y, Nomura A, et al.: "Genetic basis of patients with Bacille Calmette-Guerin osteomyelitis in Japan : identification of dominant partial IFN-γRl deficiency"J. Infect Dis. (in press).

Sasaki Y、Nomura A 等人：“日本卡介苗骨髓炎患者的遗传基础：显性部分 IFN-γR1 缺陷的鉴定”J. Infect Dis（出版中）。

Sasaki Y, et al.: "Genetic basis of patients with bacille Calmette-Guerin osteomyelitis in Japan : identification of dominant partial interferon-gamma receptor 1 deficiency as a predominant type"J Infect Dis. 185・5. 706-709 (2002)

Sasaki Y等人：“日本卡介苗骨髓炎患者的遗传基础：将显性部分干扰素-γ受体1缺陷鉴定为主要类型”J Infect Dis 185・5。

Ohga S, et al.: "Immunological aspects of Epstein-Barr virus infection"Crit Rev Oncol Hematol. 44・3. 203-215 (2002)

Ohga S等：“Epstein-Barr病毒感染的免疫学方面”Crit Rev Oncol Hematol. 203-215 (2002)。

Ohga S, et al.: "Dominant expression of interleukin 10 but not interferon gamma in CD4(-)CD8(-)alphabetaT cells of autoimmune lymphoproliferative syndrome"Br J Haematol. 119・2. 535-538 (2002)

Ohga S 等人：“自身免疫性淋巴增殖综合征的 CD4(-)CD8(-)alphabetaT 细胞中白细胞介素 10 的显性表达，但干扰素 γ 不显着”Br J Haematol 119·2 (2002)。