尿路結石形成時における結石マトリクス蛋白(オステオポンチン)遺伝子発現機構の解明
阐明尿路结石形成过程中石基质蛋白(骨桥蛋白)基因的表达机制
基本信息
- 批准号:13770889
- 负责人:
- 金额:$ 1.41万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2001
- 资助国家:日本
- 起止时间:2001 至 2002
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
尿路結石の有機物質(マトリクス)成分としてオステオポンチン(OPN)を同定し、結石形成に必須であること等を見いだしたが、結石形成時に尿細管細胞がどのような細胞内外シグナルを経てOPNを発現するかは不明で結石モデルラットにてシュウ酸負荷時に活性化される転写因子を検討し特にOPNの発現を制御する因子を検討した。骨組織において0PNと転写因子RUNX2のmRNA発現部位が同一部位で、RUNX2のノックアウトマウスでOPN mRNA発現が低下していることからOPN遺伝子の発現はRUNX2に制御されていることが推察される。RUNX2がOPN遺伝子のプロモーターとして作用しているかをルシフェラーゼアッセイにて検討し、RUNX2、ETS1とOPN遺伝子のプロモーター部位との結合をゲルシフトアッセイにて確認した。結石モデルラット腎で、OPNとRUNX2について経日的にsacrificeし、in situ hybridization、Northern blotで遺伝子発現を詳細に検討し、OPN発現前にRUNX2が発現していることを見いだした。OPN発現ベクターをMDCK細胞に遺伝子導入し安定発現型OPN過剰発現MDCK cellの株を確立した。in vitroにおいてイヌ由来腎尿細管細胞を長期培養するとリン酸カルシウムの沈着をみることが知られ、結石形成までの様子および結石形成の程度を観察する。結石形成が確認された。OPN発現ベクター導入細胞では結石が形成されやすい傾向が示唆された。
The composition of organic substances (OPN) in urinary calculi is determined, and the factors necessary for stone formation are discussed. During stone formation, urinary tubule cells are activated during acid loading, and the factors controlling the occurrence of OPN are discussed. In bone tissue, OPN mRNA and RUNX2 mRNA were expressed at the same site, but RUNX2 mRNA expression was lower than that of RUNX2. RUNX2 and OPN gene expression and function are examined, and RUNX2 and ETS1 and OPN gene expression and function are confirmed. Stone detection: kidney, OPN, RUNX2, sacrifice, in situ hybridization, Northern blot, detection of RUNX2 before OPN detection OPN discovery MDCK cell gene introduction stable OPN discovery MDCK cell gene establishment In vitro, the protein is derived from renal tubule cells cultured for a long time, and the protein and the degree of stone formation are observed. Stone formation is confirmed. OPN found that the introduced cells were prone to stone formation.
项目成果
期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Takahiro Yasui, et al.: "Eurolithiasis-9^<th> European Symposium on Urolithiasis-"Shaker Publishing, Maastricht The Netherlands. 2 (2001)
Takahiro Yasui 等人:“Eurolithiasis-9^<th>欧洲尿石症研讨会”-Shaker Publishing,荷兰马斯特里赫特。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Takahiro Yasui et al.: "Osteopontin regulates adhesion of calcium oxalate crystals to renal epithelial cells"Eurolithiasis-9^<th> European Symposium on Urolithiasis. 199-200 (2001)
Takahiro Yasui 等人:“骨桥蛋白调节草酸钙晶体与肾上皮细胞的粘附”Eurolithiasis-第 9 届欧洲尿石症研讨会。
- DOI:
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- 通讯作者:
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