未熟肺血管に於ける酸素感受性カリウムチャンネル発現に関する分子生物学的研究
未成熟肺血管氧敏感性钾通道表达的分子生物学研究
基本信息
- 批准号:14770580
- 负责人:
- 金额:$ 2.05万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では未熟な胚血管平滑筋細胞における膜電位依存性Kチャンネルの遺伝子の発現をあきらかにし、酸素感受性の膜電位依存性Kチャンネルの発達に伴う変化を明らかにした。肺動脈のうち、主肺動脈と抵抗血管を用いて、パッチクランプ法を用いて胎仔、新生仔,成獣家兎の肺動脈平滑筋細胞で膜電位依存性(酸素感受性)K電流を測定した。実験動物:生後5日の新生仔家兎と生後6-12カ月の成獣家兎を用いた。実験標本:主肺動脈および径100-200ミクロンの肺動脈より単離した平滑節細胞をもちいてパッチクランプを行った。膜電依存性(酸素感受性)K電流は主肺動脈にはほとんど存在しないことがわかった。抵抗血管には膜電位依存性(酸素感受性)K電流は存在し、新生仔では成獣に比べ有意に大きいことがわかった。PCR法、ノーザンブロット法、In situ hybridization法を用い、肺動脈平滑筋細胞における膜電位依存性Kチャンネル遺伝子の発現を調べた。膜電位依存性K電流Kv 1.5,2.1は主肺動脈にはほとんど存在しないことがわかった。抵抗血管には膜電位依存性Kチャンネルは発現しており、その発現は新生仔では成獣に比べ有意に大きいことがわかった。卵母細胞:アフリカツメガエルの卵母細胞にKチャンネルのmRNAを注入し、灌流液の酸素濃度を変化させた。卵母細胞に発現した膜電位依存性K電流Kv 1.5,2.1は酸素感受性を持っていることがわかった。
This study で は unripe な embryonic vascular smooth muscle cell に お け る membrane potential dependency K チ ャ ン ネ ル の posthumous son 伝 の 発 now を あ き ら か に し, acid sensitivity の membrane potential dependency K チ ャ ン ネ ル の 発 da に with う variations change を Ming ら か に し た. Pulmonary artery の う ち, main pulmonary artery vascular を と resistance with い て, パ ッ チ ク ラ ン を プ method with い て fetal, newborn larvae, home into 獣 兎 の で pulmonary artery smooth muscle cell membrane potential dependency (acid sensitivity) determination of K current を し た. Experimental animals: 5 days after birth, breed newborn domestic rabbits と; 6 to 12 months after birth カ months, breed adult 獣 domestic rabbits を use と た. Be 験 specimen: the main pulmonary artery お よ び diameter of 100-200 ミ ク ロ ン の pulmonary よ り 単 from し た smooth ganglion cells を も ち い て パ ッ チ ク ラ ン プ を line っ た. The membrane electrical dependence (acidin sensitivity)K current exists in the <s:1> main pulmonary artery に ほとん ほとん ほとん <e:1> <e:1> <s:1> and な とがわ とがわ った った. Resistance vessels に は membrane potential dependency (acid sensitivity) K current は し, newborn larvae で は into 獣 に than べ intentionally に き い こ と が わ か っ た. PCR method, ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト method, the In situ hybridization method を い, pulmonary artery smooth muscle cells に お け る membrane potential dependency K チ ャ ン ネ ル posthumous son 伝 の 発 now を adjustable べ た. Membrane potential dependence K current Kv 1.5,2.1 <s:1> main pulmonary artery に ほとん ほとん ほとん <s:1> な とがわ とがわ とがわ った った った present. Resistance to blood vessels に は membrane potential dependency K チ ャ ン ネ ル は 発 now し て お り, そ の 発 now は newborn larvae で は into 獣 に than べ intentionally に き い こ と が わ か っ た. Oocyte: ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル の oocytes に K チ ャ ン ネ ル の mRNA を の acid injection し, perfusion fluid element concentration を variations change さ せ た. Oocytes に present with た membrane potential dependence K current Kv 1.5,2.1 <s:1> acid sensitivity を holding って る る とがわ とがわ とがわ った った.
项目成果
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