ラット下肢同種移植に於ける急性期拒絶反応メカニズムの研究

大鼠同种异体下肢移植急性期排斥反应机制研究

• 批准号: 14770989
• 负责人: 齋藤 ちひろ
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770989/
• 关键词: ラット下肢移植; 同種移植; 同系移植; 急性期拒絶反応; ストレス応答; heat shock protein 70; ラット下肢同種移植; ホルマリン固定標本; HE染色所見; 皮膚軟部組織; 硬組織; 大脳海馬; 脾臓

1.動物実験実験群(同種移植群:F344 to Lewis)および対照群(同系移植群:Lewis to Lewis)につきラット右下肢移植を行い、(1)皮膚軟部組織(2)膝関節(3)脛骨(4)脾臓(5)脳をサンプルとして、それぞれ術直後・術後1日・術後3日・術後7日・術後12日に採取した。Nは各期日につきそれぞれ10とし、そのうち5はパラフィン包埋標本、さらに5は凍結標本とした。2.蛋白抽出皮膚軟部組織につき、凍結標本より蛋白抽出を行った。これは今後Western blottingのサンプルとして使用される。3.組織学的検索HE染色標本について組織学的検索を行った。対照群では、術後経過上顕著な組織学的変化は認めなかった。実験群では、術後3日目からの皮下結合組織浮腫が顕著となり、術後7日目には著明な炎症細胞浸潤を認めた。表皮は術後7日目まで正常な形態を保ったが、術後12日目には表皮変性が顕著となり、また毛包等の皮膚付属器の変性も顕著となった。4.免疫組織化学的検索皮膚軟部組織につき、ラット下肢同種および同系移植急性期に於けるストレス応答を検索するため、heat shock protein 70に対する免疫染色を行った。表皮細胞および浅層毛包細胞では、実験群・対照群ともに術直後より陽性を示したが、対照群では以後顕著な変化は無かったのに対し、実験群では術後7日目までシグナルの増強を認め、表皮変性が顕著となる術後12日目には一転して陰性化した。また、実験群では、皮下結合組織浮腫に先立って、微小血管内皮細胞に陽性所見を認めた。

Animal experimental population (allograft population :F344 to Lewis)および control population (allograft population :Lewis to Lewis) に つ き ラ ッ ト line right lower limb transplantation を い, (1) skin soft tissue section (2) the knee masato (3) (4) splenic tibial (5) 脳 を サ ン プ ル と し て, そ れ ぞ れ straight after the operation, postoperative 1, 3, postoperative, postoperative 7, taking 12 に し た. N は periods, に つ き そ れ ぞ れ 10 と し, そ の う ち 5 は パ ラ フ ィ ン embedding specimens, さ ら に 5 は frozen specimen と し た. 2. Protein extraction: The soft tissue of the skin に に に に, frozen specimens よ, and protein extraction を rows った. In the future, Western blotting will use される, プ, プ, と, て. 3. Histological 検 rope HE-stained specimens に て て histological 検 rope を row った. The histological changes of the group で で and the previous 顕 and な after the operation were identified as めな った った. Be 験 group で は, postoperative 3 orders か ら の subcutaneous combined tissue edema が 顕 the と な り, 7 orders, postoperative に は zhao Ming な inflammatory cells infiltrating を recognize め た. Skin は postoperative 7 orders ま で normal な forms を bartender っ た が, postoperative 12 mesh に は skin - sex が 顕 the と な り, ま た bales etc. の skin pay belong to implement の - sex も 顕 the と な っ た. 4. Immunohistochemical 検 cable skin soft department organization に つ き, ラ ッ ト lower limb same お よ び acute に homologous transplantation in け る ス ト レ ス 応 answer を 検 cable す る た め, heat shock protein 70 に す seaborne る immune dyeing line を っ た. Epidermal cells お よ び shallow hair package cell で は, be 験 group, according to the group of seaborne と も に straight after operation よ り positive を shown し た が, according to the group of seaborne で は 顕 after the な variations change は no か っ た の に し seaborne, be 験 group で は postoperative 7 orders ま で シ グ ナ ル の raised strong を recognize め, skin - が 顕 the と な る postoperative 12 mesh に は a planning し て feminization し た. Youdaoplaceholder0, experimental group で で, subcutaneous connective tissue edema に first って, positive findings of microvascular endothelial cells に を confirmed めた.