血管内皮細胞が産生するグリコサミノグリカン糖鎖の微細構造解析とその代謝調節

血管内皮细胞产生的糖胺聚糖糖链的超微结构分析及其代谢调控

• 批准号: 14771296
• 负责人: 藤原 泰之
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokuriku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771296/
• 关键词: プロテオグリカン; グリコサミノグリカン; 蛍光標識糖鎖電気泳動法; 糖鎖構造; 増殖因子; サイトカイン; 血管内皮細胞; 血管平滑筋細胞; 機能ドメイン; 細胞密度依存性

本研究の目的は,蛍光標識糖鎖電気泳動法を用いて各種血管内皮細胞が産生するグリコサミノグリカン(GAGs)の微細構造とその合成調節を明らかにすることである。今年度は各種血管内皮細胞を用い,血管の部位の違いによる糖鎖構造の違いを検討するとともに,細胞増殖因子・サイトカインによるGAG微細構造の合成調節を調べ,以下の知見を得た。1.各種血管内皮細胞が産生するGAGsの微細構造解析ウシ大動脈由来血管内皮細胞が産生するヘパラン硫酸(HS)の主な二糖組成は,UA-GlcNAc>UA-GlcNS>UA(2S)-GlcNSであり,ヒト冠動脈内皮細胞およびヒト脳微少血管内皮細胞においても同様の結果が得られた。しかしながら,ヒト大動脈内皮細胞が産生するHSの主な二糖組成の存在比はUA(2S)-GlcNS>UA-GlcNS>UA-GlcNAcの順であった。一方,検討したすべての内皮細胞層において,コンドロイチン/デルマタン硫酸(CS/DS)の主な二糖組成は,UA-GalNAc(6S)>UA-GalNAc(4S)>UA-GalNAc(4S,6S)であった。以上より,ヒト大動脈血管内皮細胞は他の内皮細胞に比べ硫酸化度の高いHSを保持していることが示された。このような糖鎖構造の違いは内皮機能をはじめとする血管組織の機能調節に影響を及ぼすものと推察される。2.増殖因子・サイトカインによる血管内皮細胞GAGsの微細構造調節高細胞密度のウシ大動脈由来血管内皮細胞をFGF-2,VEGF, TGF-β,IL-1βおよびTNF-αでそれぞれ処理した場合,GAGsのトータル量を変化させる増殖因子・サイトカインは存在したが,HSおよびCS/DSの二糖組成を顕著に変化させるものは認められなかった。しかしながら,低細胞密度の内皮細胞において,FGF-2がHSの構成二糖の一つであるUA(2S)-GlcNSの割合を増加させ,その結果UA-GlcNAcの割合を減少させることが示された。一方,CS/DSの二糖組成は,FGF-2による変化は認められなかった。従って,FGF-2は血管内皮細胞の細胞密度に依存した様式でHS糖鎖の微細構造調節に関与することが示唆された。

这项研究的目的是阐明使用荧光标记的聚糖电泳产生的各种血管内皮细胞产生的糖胺聚糖（GAG）的微观结构和合成调节。今年，我们使用各种血管内皮细胞来检查由于血管位置的差异而导致的聚糖结构差异，并研究了细胞生长因子和细胞因子对GAG微结构的合成，并获得了以下发现。 1。各种血管内皮细胞产生的堵嘴的微观结构分析硫酸乙酰肝素（HS）由牛主动脉衍生的血管内皮细胞产生的主要二糖组成是UA-GLCNAC> UA-GLCNAC> UA-GLCNS> UA-GLCNS> ua-glcns> ua（2s） - glcn和类似的人类和人类的cor虫，是人类和人类coron的coronary coron。内皮细胞。然而，人主动脉内皮细胞产生的HS的主要二糖组成的丰度比按UA（2S）-GLCNS> UA-GLCNS> UA-GLCNAC的顺序。另一方面，在研究的所有内皮细胞层中，软骨素/皮肤硫酸盐（CS/DS）的主要二糖组成是UA-GALNAC（6S）> UA-GALNAC（4S）> UA-GALNAC> UA-GALNAC> UA-GALNAC（4S，4S，6S）。从以上表明，人主动脉血管内皮细胞保留了HS，其硫酸度高于其他内皮细胞。据估计，聚糖结构的这种差异会影响包括内皮功能在内的血管组织的调节。 2。当高细胞密度牛主动脉衍生的血管内皮细胞用FGF-2，VEGF，VEGF，TGF-β，IL-1β和TNF-α分别处理，没有生长因子和细胞因子的总体变化，gag的量没有重大变化，而gag的量很大，则在高细胞密度的血管内皮细胞中对血管内皮细胞的微观结构调节进行了生长因子和细胞因子的微观结构调节。观察到CS/DS。然而，在低细胞密度的内皮细胞中，表明FGF-2增加了UA（2s）-GLCN的比例，这是HS的组成二糖之一，从而降低了UA-GLCNAC的比例。另一方面，没有观察到由于FGF-2引起的CS/DS的二糖组成的变化。因此，有人提出，FGF-2以依赖于血管内皮细胞的细胞密度的方式参与了HS聚糖的微观结构调节。