血管内皮細胞が産生するグリコサミノグリカン糖鎖の微細構造解析とその代謝調節

血管内皮细胞产生的糖胺聚糖糖链的超微结构分析及其代谢调控

• 批准号: 14771296
• 负责人: 藤原 泰之
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokuriku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771296/
• 关键词: プロテオグリカン; グリコサミノグリカン; 蛍光標識糖鎖電気泳動法; 糖鎖構造; 増殖因子; サイトカイン; 血管内皮細胞; 血管平滑筋細胞; 機能ドメイン; 細胞密度依存性

本研究の目的は,蛍光標識糖鎖電気泳動法を用いて各種血管内皮細胞が産生するグリコサミノグリカン(GAGs)の微細構造とその合成調節を明らかにすることである。今年度は各種血管内皮細胞を用い,血管の部位の違いによる糖鎖構造の違いを検討するとともに,細胞増殖因子・サイトカインによるGAG微細構造の合成調節を調べ,以下の知見を得た。1.各種血管内皮細胞が産生するGAGsの微細構造解析ウシ大動脈由来血管内皮細胞が産生するヘパラン硫酸(HS)の主な二糖組成は,UA-GlcNAc>UA-GlcNS>UA(2S)-GlcNSであり,ヒト冠動脈内皮細胞およびヒト脳微少血管内皮細胞においても同様の結果が得られた。しかしながら,ヒト大動脈内皮細胞が産生するHSの主な二糖組成の存在比はUA(2S)-GlcNS>UA-GlcNS>UA-GlcNAcの順であった。一方,検討したすべての内皮細胞層において,コンドロイチン/デルマタン硫酸(CS/DS)の主な二糖組成は,UA-GalNAc(6S)>UA-GalNAc(4S)>UA-GalNAc(4S,6S)であった。以上より,ヒト大動脈血管内皮細胞は他の内皮細胞に比べ硫酸化度の高いHSを保持していることが示された。このような糖鎖構造の違いは内皮機能をはじめとする血管組織の機能調節に影響を及ぼすものと推察される。2.増殖因子・サイトカインによる血管内皮細胞GAGsの微細構造調節高細胞密度のウシ大動脈由来血管内皮細胞をFGF-2,VEGF, TGF-β,IL-1βおよびTNF-αでそれぞれ処理した場合,GAGsのトータル量を変化させる増殖因子・サイトカインは存在したが,HSおよびCS/DSの二糖組成を顕著に変化させるものは認められなかった。しかしながら,低細胞密度の内皮細胞において,FGF-2がHSの構成二糖の一つであるUA(2S)-GlcNSの割合を増加させ,その結果UA-GlcNAcの割合を減少させることが示された。一方,CS/DSの二糖組成は,FGF-2による変化は認められなかった。従って,FGF-2は血管内皮細胞の細胞密度に依存した様式でHS糖鎖の微細構造調節に関与することが示唆された。

In this study, the aim of this study was to use various vascular endothelial cells to synthesize and synthesize the microarray of vascular endothelial cells (GAGs). In this year, all kinds of vascular endothelial cells were used, and the blood vessels were used in this year. This year, all kinds of vascular endothelial cells were used in this year. This year, various kinds of vascular endothelial cells were used in this year. This year, all kinds of vascular endothelial cells were used in this year, the vascular endothelial cells were used in this year, the vascular endothelial cells were used in this year, and the cellular factors were used. 1. Microanalysis of various kinds of vascular endothelial cell GAGs microanalysis of the origin of vascular endothelial cell production of biosaccharides, UA-GlcNAc>UA-GlcNS>UA (2S)-GlcNS, UA-GlcNAc>UA-GlcNS>UA (2S)-GlcNS. The results showed that the results of microvascular endothelial cell assay showed the same results. There is a ratio of UA (2S)-GlcNS>UA-GlcNS>UA-GlcNAc to disaccharides in the major disaccharides of HS. On one side, UA-GalNAc (6S) & gt;UA-GalNAc (4S) & gt;UA-GalNAc (4Sje 6S) were made up of disaccharides, UA-GalNAc (6S) & gt;UA-GalNAc (4S). In the above tests, the activity of vascular endothelial cells and other endothelial cells was higher than that of HS cells. The vascular tissue can be detected by the endothelial mechanism, the vascular tissue, and the vascular tissue. two。 The GAGs of vascular endothelial cells was microengineered, which resulted in high cell density, high cell density, high cell HS is made up of disaccharides, CS/DS, and disaccharides. Low cell density, low cell density, low cell density, On the one hand, CS/ DS disaccharides are made up of disaccharides, and FGF-2 is used to reduce the cost of disaccharides. FGF-2, vascular endothelial cell density dependent cell density, HS glucose microarray, microvascular endothelial cell density, cell density, vascular endothelial cell density, cell density, cell density,