ヒト自然抗体によって認識される下等動物の極性糖脂質の構造とその生理活性

人类天然抗体识别的低等动物极性糖脂的结构及其生理活性

• 批准号: 14780472
• 负责人: 糸乗 前
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Shiga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780472/
• 关键词: 糖脂質; 複合糖質; 構造解析

糖脂質の抽出及び構造解析:環形動物ヒル綱チスイビル(和漢薬スイテツ)から有機溶媒を用いて糖脂質を抽出した。極性糖脂質を得るため,イオン交換クロマトグラフィーで分画をし,さらなる分画はケイ酸カラムクロマトグラフィーを用いて,有機溶媒の組成比率や混合溶媒を変え,単一の糖脂質に精製した。糖鎖の数や極性基の種類などは,TLC上の移動度と発色試薬検出によって推定した。糖の種類は,電磁波による酸分解あるいはフッ化水素で処理後,その糖誘導体をGCとGC-MS分析で決定した。また,糖鎖結合の位置は部分メチル化物の酸加水分解物を誘導体化し解析した。糖脂質全体,あるいは酸部分加水分解物の分子量はMALDI/TOF-MSによって測定し,詳細な分子量及び糖鎖配列の測定は共同研究としてFAB-MS分析で行った。糖鎖のアノマー配位も同じく共同研究としてNMR分析で行い,さらに部位特異的糖切断酵素による分解物の解析により決定した。4糖と5糖の極性糖脂質の構造解析を行いGlc,Gal,GlcNAcを含有しGlcNAcに極性基あるホスホコリンが結合していることが分かった。ヒト血清中の抗極性糖脂質抗体の検索:プラスチック製のマイクロタイタープレートに精製したヒル由来の糖脂質をコートした。ブロッキング後、希釈したヒト血清を反応させ,抗ヒト二次抗体に結合した。Peroxidaseによって発色させた基質をマイクロタイタープレートリーダーで測定した。抗ヒト二次抗体にイムノグロブリンサブクラス特異的な抗体を用い,血清中の抗体のサブクラスを推定したところ,IgGクラス抗体と強く反応した。同様な手法により,TLCイムノステイニングも行った。4糖と5糖の糖脂質の比較および構造類似体のブタ回虫の糖脂質を用いて抗体特異性を解析したところ,GlcNAcの6位にホスホコリンが結合した構造が主に認識されていることが分かった。

Extraction and analysis of glycolipids: environmental animals are used to extract glycolipids from organic solvents. The sexual glycolipid was successfully obtained, and the glycolipids were separated and drawn separately. The organic solvent composition ratio was the mixed solvent concentration, and the glycolipid concentrate was used. The number of glucose is related to the number of basic information, and the degree of mobility on TLC shows the effect on the presumption. In the case of glucose, the determination was determined by GC GC-MS analysis after the hydrolysis of water by electromagnetism wave digestion. The combination of sugar and sugar is characterized by the addition of acid and hydrolysate. Glycolipid whole, hydrolysate MALDI/TOF-MS, determination of molecular weight and determination of sugar, determination of molecular weight and determination of sugar, common study, FAB-MS analysis. The carbohydrate cleavage enzyme was analyzed by the sugar cleavage enzyme, the decomposition product was analyzed, and the NMR analysis was carried out. 4. 5-glycosylated glycolipid analysis. The Glc,Gal,GlcNAc contains GlcNAc-specific genes in combination with different levels of glucose. The anti-glycolipid antibody in the serum was called "anti-glycolipid" antibody. After the treatment, we hope that the serum will be reacted, and the secondary antibody against the virus will be combined with the antibody. Peroxidase, color, color and color. Anti-secondary antibody, anti-secondary antibody, specific antibody, serum antibody, presumptive antibody, IgG antibody, antibody. It's the same as the trick, TLC, and you know, you don't know what to do. 4 glycolipids, 5 glycolipids, 5 glycolipids, 4 glycolipids, 5 gly

项目成果

糸乗前, 青木一弘: "無脊椎動物を特徴づける糖脂質の糖鎖"バイオサイエンスとインダストリー. 61巻・10号. 673-676 (2003)

Mae Itonari、Kazuhiro Aoki：“表征无脊椎动物的糖脂链”《生物科学与工业》第 61 卷，第 10 期。673-676 (2003)

糸乗前, 卯田昌代, 山脇沙帆, 青木一弘, 杉田陸海: "食用キノコのスフィンゴ脂質I.エリンギ,Pleurotus eryngiiの遊離セラミドおよびセレブロシド"滋賀大学教育学部紀要 自然科学. 53号. 27-34 (2003)

Mae Itonari、Masayo Uta、Saho Yamawaki、Kazuhiro Aoki、Rikumi Sugita：“食用菌的鞘脂 I. 杏鲍菇的游离神经酰胺和脑苷脂”滋贺大学自然科学教育学部公告 53，第 27-34 号（2003 年）。 ）

K.Aoki, R.Uchiyama, S.Yamauchi, T.Katayama, S.Itonori, M.Sugita, N.Hada, J.Hada, T.Takeda, H.Kumagai, K.Ymamoto: "Newly discovered neutral glycosphingolipids in Aureobasidin A-resistant Zygomycetes : Identification of a novel family of gala-series glycoli

K.Aoki、R.Uchiyama、S.Yamauchi、T.Katayama、S.Itonori、M.Sugita、N.Hada、J.Hada、T.Takeda、H.Kumagai、K.Ymamoto：“新发现的中性糖鞘脂

S.Itonori, M.Takahashi, T.Kitamura, K.Aoki, J.T.Dulaney, M.Sugita: "Microwave-mediated analysis for sugar, fatty acid, and sphingoid compositions of glycosphingolipids"Journal of Lipid Research. Vol.45. 574-581 (2004)

S.Itonori、M.Takahashi、T.Kitamura、K.Aoki、J.T.Dulaney、M.Sugita：“微波介导的糖鞘脂的糖、脂肪酸和鞘氨醇成分的分析”脂质研究杂志。

K.Aoki, R.Uchiyama, S.Itonori, M.Sugita, F-S.Che, A.Isogai, N.Hada, J.Hada, T.Takeda, H.Kumagai, K.Yamamoto: "Structural elucidation of novel phosphocholine-containing glycosylinositol-phosphoceramides in filamentous fungi and their induction of cell deat

K.Aoki、R.Uchiyama、S.Itonori、M.Sugita、F-S.Che、A.Isogai、N.Hada、J.Hada、T.Takeda、H.Kumagai、K.Yamamoto：“新型磷酸胆碱的结构阐明