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肝臓の領域特異的分化を制御する転写調節因子の同定と機能解析

控制肝脏区域特异性分化的转录调控因子的鉴定和功能分析

基本信息

批准号：
14704071
负责人：
横内裕二
金额：
$ 17.97万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は昨年度おこなったdegenerate RT-PCRによって同定された遺伝子群のうち、Id関連遺伝子のひとつであるId3に着目しその機能解析を行った。我々は本遺伝子の肝発生における機能を明らかにする目的で、肝発生過程におけるその詳細な発現パターンを解析した。Id3は肝原基が形成された直後である発生段階14において肝原基全体で発現していた。しかし、近位遠位軸にそった形態学的特徴が顕著になる発生段階20では、腸管に関して近位側の総胆管内胚葉におけるその発現は消失する一方で、遠位側の肝臓本体における発現は継続していた。すなわち、肝-胆管系において、Id3は遠位特異的に発現する。次にそのmRNA量の経時的な変化を3日-14日胚肝臓において計測したところ、3日目と6日目に発現のピークがあり、6日以降からは急速に減少することが明らかになった。この結果はId3が肝臓発生の異なった二つの発生段階において機能している可能性を示唆する。次にId3の機能を明らかにするために、Id3に対するsiRNAを作成し、肝内胚葉に導入した際の効果を調べた。Id3特異的siRNAの導入により肝臓が縮小した。一方、器官培養系を用いてId3過剰発現の効果を検討したところ、肝臓内胚葉の増殖が促進された。さらにin ovoにおいて肝臓内胚葉特異的にId3 cDNAを恒常的に発現したところ、ニワトリ肝臓の分化マーカーであるalbuminの発現が抑制された。以上の結果はId3が肝-胆管系における遠位側、すなわち肝臓内胚葉の領域特異的増殖の促進因子であることを強く示唆している。また今回の結果はId3が肝発生分化状態の維持に関与している可能性を示唆する。

In the current year, we have the same information as the degenerate RT-PCR sub-group, the Id sub-group, and the Id3 target. We can analyze the data. We can understand the purpose and process of the health care system in our hospital. The liver primordium of Id3 was formed, and the whole liver primordium was found in the whole liver. The characteristics of orthopedics, proximal position, bile duct endoderm, bile duct endoderm, liver, liver, body, body, The characteristics of the liver-bile duct system, the liver-bile duct system and the Id3 were detected. When the amount of mRNAs is not required, the fetal liver temperature will be adjusted from the 3rd to the 14th, the temperature will not be detected on the 6th, and the temperature will be reduced on the 6th. Results the results showed that the possibility of Id3 liver test was significantly higher than that of the control group in the second stage. The secondary Id3 machine can tell you that the siRNA is made by Id3, and that the endoderm of the liver is implanted into the liver. The special siRNA of Id3 has been loaded into the liver. On the one hand, the organ culture system is to use Id3 to promote the proliferation of liver endodermis. The Id3 cDNA of the liver endodermis is characterized by the constant in ovo and differentiation of the liver. The inhibition is present in the albumin. The above results showed that the Id3 hepatobiliary system had an abnormal position, and that the colonization promoting factor in the field of hepatobiliary endodermis in the hepatobiliary system was strongly expressed. The results of this review show that the possibility of maintaining the differentiation of the liver and the possibility of liver differentiation in Id3.