電気効果を利用した菌体内有用物質の選択的放出分離回収システムの開発

利用电效应开发细菌内部有用物质的选择性释放分离和回收系统

• 批准号: 14750615
• 负责人: 須加 実
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14750615/
• 关键词: 電気効果; 酵母菌; 電気泳動; 蛋白質放出; 生物プロセス; 細胞破砕; バイオグリーンテクノロジー; 高電圧パルス

本研究は,電気効果を生物プロセスの技術に応用発展させ,効率的に菌体からバイオ有用物質を生産するシステムを開発することを目的とする.既に平成14年度には,直流高電圧パルスによる細胞膜破壊を利用した電気放出によって,菌体内有用蛋白質を選択的に放出させる技術を確立するため,高電圧放電パルスを印加する装置を製作し,菌体内に特異的に存在する蛋白質を放出させることに成功した.さらに平成15年度には,従来の煩雑な分離精製工程を減らすため,電気泳動によって菌体内から蛋白質を直接分離する技術を確立するため,菌体と蛋白質を電気泳動により直接分離させることに成功し,また分離した蛋白質を電気泳動によって限外ろ過膜上に回収することも可能となった.本年度は,平成14年度,15年度に製作した装置で得られた結果をもとに,諸々の問題点を再検討した.これまでの問題点を解消し,最終的に透過性の向上した細胞内から連続した蛋白質の回収を可能にするシステムを構築することが可能となった.

This study aims to develop the application of electro-biological technology and the production of useful substances by efficient bacteria. In the 14th year of 2014, the technology of cell membrane disruption and release of useful proteins in bacteria was established. The device for high voltage cell membrane disruption and release of proteins specific to bacteria was successfully manufactured. In 2015, the separation and purification of protein in bacteria was successfully carried out. This year, the production of equipment in the 14th and 15th years was completed, and the problems were discussed again. This problem is solved, and finally the permeability of the cell is increased.

项目成果

Minoru Suga: "High-efficiency electroporation by freezing intact yeast cells with addition of calcium."Current Genetics. 43. 206-211 (2003)

Minoru Suga：“通过添加钙来冷冻完整的酵母细胞，从而实现高效电穿孔。”《当代遗传学》。

Minoru Suga: "Electroporation of Schizosaccharomyces pombe by hyperosmotic post-pulse incubation."Bio Techniques. 36. 218-221 (2004)

Minoru Suga：“通过高渗后脉冲孵育对粟酒裂殖酵母进行电穿孔。”生物技术。

Minoru Suga: "High osmotic stress improves electro-transformation efficiency of fission yeast."PEMS Microbiology Letter. 225. 235-239 (2003)

Minoru Suga：“高渗透压提高了裂殖酵母的电转化效率。”PEMS 微生物学快报。

Minoru Suga: "High-efficiency electroporation by freezing intact yeast cells with addition of calcium"Current Genetics. (in press). (2003)

Minoru Suga：“通过添加钙冷冻完整酵母细胞进行高效电穿孔”《当代遗传学》。