薬剤排出ポンプによる薬剤認識・排出メカニズムの分子解析

药物外排泵药物识别和外排机制的分子分析

• 批准号: 14760049
• 负责人: 平賀 和三
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Kyoto Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760049/
• 关键词: 多剤耐性; 薬剤排出ポンプ; 薬剤認識; pdr5; 阻害物質

薬剤排出ポンプは、ガンの多剤耐性に関与し、その治療を困難にしている。その特異的阻害物質(多剤耐性克服物質)は、ガンに治療に有効と考えられる。私は、酵母をモデルとして取得に成功した微生物由来の多剤耐性克服物質を精製し、その構造・機能解析を行なった。多剤耐性克服物質を精製し、新規と予想される物質、KPI(Kitasatospora Pdr5 inhibitor)の構造を明らかにした(投稿準備中)。本物質は、興味深いことに多数の水酸基よりなる親水性に富んだ部分と、トリエン構造よりなる疎水性の部分よりなることが明らかとなった。阻害活性に必須な部分はトリエンの逆側に位置しており、酸に不安定であった。本物質の分子量は1193であり、既報の酵母Pdr5阻害物質であるFK506とは明らかに異なっていた。本物質は新規物質であると予想される。本物質は、シクロヘキシミドやセルレニンの様なPdr5によって排出される薬剤と併用した場合にのみ酵母の増殖を阻害した。一方、酵母Snq2の機能は阻害しなかったことから、Pdr5特異的に作用していると推察された。本物質は、Pdr5によって排出されることが明らかとなっている蛍光物質ローダミンの細胞外排出を阻害し、細胞内への蓄積を認めた。そこで、本物質がpdr5遺伝子の発現を阻害しているか、機能を阻害しているか否かを精査するため、pdr5遺伝子のプロモータにβガラクトシダーゼ遺伝子を連結したレポーター遺伝子を用い、精製した阻害剤を添加した結果、発現には影響しないことが明らかとなった。また、ウエスタンブロッティングによっても発現には影響しないことが明らかとなった。従って、新規な本阻害物質は、Pdr5の薬物排出機能を阻害していることが明らかとなった。

The patient's tolerance and resistance to the discharge of ぬンンプは and ガンの多剤 are difficult, and the treatment of その is difficult. It is a specific inhibitory substance (multiple resistance overcoming substance), and it is effective in treating the disease. The origin of private yeast, yeast and yeast, the success of microorganisms, the resistance to overcome the substance, the refinement of the substance, and the analysis of the structure and function of the product. Multi-resistant overcoming substance を refined し, new regulation と conceived さ れ る substance, KPI (Kitasatospora Pdr5 inhibitor) の structure を 明ら か に し た (preparing for submission). This substance has a deep taste, a large amount of water, an acidic base, a hydrophilic nature, and a rich, partially odorless substance. , トリエン structure よりなる疎 Water-based の part よりなることが明らかとなった. It blocks the active part of the essential part, the reverse side of the position, and the acidity of the unstable part. The molecular weight of this substance is 1193, and the reported yeast Pdr5 inhibitory substance is FK506, the same as the original one. This substance is a newly regulated substance. This material is used It can prevent the growth of yeast when it is discharged and used together. On the one hand, the function of yeast Snq2 is blocked and the specific function of Pdr5 is investigated. This substance is released and Pdr5 is released The light substance is prevented from being discharged from the outside of the cell and accumulated within the cell.そこで、This substance がpdr5 remains 伝子の発appears to hinder しているか、Functions are blocked Harmful and careful inspectionガラクトシダーゼ伝子をconnectionしたレポーター缝子を用い、RefinedしThe result of the hindrance is the result, the effect is the effect.また, ウエスタンブロッティングによっても発成には affects しないことが明らかとなった.従って, the new regulation of this harmful substance, Pdr5's substance discharge function is not harmful.