筋ジストロフィーモデル細胞株を用いた筋再生因子と筋萎縮進行因子の解析

使用肌营养不良模型细胞系分析肌肉再生因子和肌肉萎缩进展因子

• 批准号: 14770106
• 负责人: 中山 由紀
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770106/
• 关键词: 筋ジストロフィー; mdxマウス; 筋再生; Thymosin β4; 筋肉

筋ジストロフィー(筋ジス)は「筋繊維の変成、壊死を主病変とし、臨床的には進行性の筋力低下をみる遺伝性の疾患」と定義されている。最も重篤な病状を示すデュシェンヌ型筋ジストロフィー(DMD)は新生男児の3500人に1人の高頻度で見られる。DMDは年齢依存的に進行していくため、DMD患者には筋萎縮や筋力低下をもたらす他の因子も存在していると推察される。このような因子を同定するために、我々は正常マウスとDMDのモデルマウスであるmdxマウスの骨格筋由来の細胞株をそれぞれ作製し、mdx変異により発現変動する遺伝子をマイクロアレイ解析を用いて探索した。その結果、mdxマウス細胞株で発現が低下している新規の分子、regeneration -associated muscle protease (RAMP)を得た。マウスRAMPはtrypsin-like serine protease domain, CUB domain, Sushi domainを持ち、720アミノ酸からなる機能未知の分泌性タンパク質であった。RAMP mRNAは正常なマウスの骨格筋と脳に発現し、特に筋損傷を与えられた骨格筋内の再生部位で強く発現誘導された。さらに、ヒト正常骨格筋由来の細胞株と比べ、6人のDMD患者骨格筋由来の細胞株ではRAMP mRNAの発現は低下していることが明らかになった(東京女子医大・斉藤加代子博士、神戸大・松尾雅文博士との共同研究)。これらの結果はRAMPが骨格筋の再生過程に働き、その発現低下はヒトDMDの病態進行にも関与している可能性を示唆している。現在RAMPトランスジェニックマウスを作製し、筋再生におけるRAMPの機能を検討している。さらにノックアウトマウスも作製中であり、これらのマウスの解析を行うことにより筋再生時のRAMPの機能を明らかにできると考えられる。またmdxマウス細胞株で発現昂進していたThymosin β4の発現と機能解析を行った。その結果、Thymosin β4 mRNAはマウス筋再生時に発現昂進する事が明らかになった。さらに、Thymosin β4はin vitroでマウス筋細胞株C2C12の移動を促進し、またC2C12にはThymosin β4に対する走化性があることが明らかになった。Thymosin β4のトランスジェニックマウスも作製したので、これを利用することによりThymosin β4を筋再生の関係をより詳細に検討する予定である。

The definition of "muscle development, muscle death, main disease" and "clinical progressive muscle weakness, residual disease" is included. The most severe symptoms were found in 1 out of 3500 newborn males. DMD is dependent on the development of the disease, and DMD patients have muscle atrophy, muscle weakness, and other factors. The cell lines from which the DMD gene originated were analyzed for the purpose of determining whether the gene was active or not. As a result, mdx cell lines developed new molecules, regeneration-associated muscle protease (RAMP).マウスRAMPはtrypsin-like serine protease domain, CUB domain, Sushi domainを持ち、720アミノ酸からなる功能未知の分泌性タンパク质であった。RAMP mRNA is strongly induced in normal, damaged, and regenerated sites within the tendon. RAMP mRNA expression in cell lines derived from normal skeletal muscle cells and DMD patients was reduced (joint study by Dr. Kayoko Saito, Tokyo Women's Medical University, and Dr. Masafumi Mitsuo). The results show that RAMP plays an important role in the regeneration process of bone marrow, and the occurrence of DMD plays an important role in the development of DMD. RAMP is now under control and regeneration. RAMP's functions are discussed.さらにノックアウトマウスも作制中であり、これらのマウスの解析を行うことにより筋再生时のRAMPの功能を明らかにできると考えられる。The expression and function of Thymosin β4 were analyzed. As a result, Thymosin β4 mRNA is present during muscle regeneration. Thymosin β4 in vitro promotes cell migration in C2C12 and Thymosin β4 in C2C12. Thymosin β 4's growth and development are discussed in detail.