新規ピコルナウイルスであるアイチウイルスのゲノム非翻訳領域の機能解析

新型小核糖核酸病毒爱知病毒基因组非翻译区的功能分析

• 批准号: 14770132
• 负责人: 佐々木 潤
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770132/
• 关键词: ピコルナウイルス; ステム-ループ構造; 非翻訳領域; ウイルスRNAの複製; パッケージング

アイチウイルスは、急性胃腸炎関連の新規ピコルナウイルスである。本研究は、アイチウイルスゲノム5'および3'非翻訳領域のウイルス複製における機能を明らかにすることを目的としている。我々はまず、感染性cDNAクローンを用いたsite-directed mutagenesisにより、ゲノム5'末端に形成される3つのステム-ループが、ウイルスRNAの複製に必須であることを示した。これらの二次構造が+鎖で正確に形成されること、および2つ目のステム-ループのループ部分の塩基配列が、RNAが複製するために重要であることが明らかとなった。さらに、3つのステム-ループのうち、最も5'末端にあるステム-ループの、ステム構造を壊さずにステム中央部の7塩基対の配列を置換した変異体は、RNA複製・タンパク質合成に影響はないが、プラーク形成能を欠くという性状を示す。この変異体が感染している細胞において、empty capsidの形成に影響はみられないが、成熟粒子の形成が著しく阻害されていることを明らかにした。つまりこの結果は、ゲノム5'末端の最初のステム-ループがウイルス粒子へのゲノムのパッケージングに関わっていることを示している。これは、ピコルナウイルスにおいて、パッケージングに関わる領域が同定された最初の例である。以上のように、ゲノム5'末端は、ウイルスRNAの複製とゲノムのパッケージングに関わる領域であることが明らかとなった。さらに我々は3'非翻訳領域の機能解析を行い、未発表であるが、3'非翻訳領域もまた、ウイルスRNAの複製に必須であることを示すデータを得ている。このように、アイチウイルスの複製におけるゲノム5'および3'非翻訳領域の機能が明らかになりつつある。

New regulations on acute gastroenteritis This study aims to clarify the function of the 5'and 3' non-inverted domain. This is shown in the fact that during site-directed mutagenesis of infectious cDNA clones, a three-membered mutant is formed at the 5'end of the mutant, which is necessary for the replication of the mutant RNA. This secondary structure is important for the correct formation of DNA sequences and RNA replication. In addition, the 3-star family-1, the 5-star family-1, the family structure-1, the 7-star family-1, the family structure-1, the family structure-1, the The infection of these allogeneic particles affects the formation of empty capsid, and the formation of mature particles prevents them from being damaged. The results of this study are as follows: 1. The most important part of the study is to study the relationship between the two groups. This is the first example of a domain that has been identified. In the above, the 5'-terminal end of the RNA is copied to the domain of the RNA. The function of the 3'non-inverted domain is analyzed, the expression is not displayed, the 3' non-inverted domain is displayed, and the RNA replication is required. The function of 5'and 3' non-inverted fields is clearly defined.

项目成果

J.Sasaki, K.Taniguchi: "The 5'-end sequence of the genome of Aichi virus, a picornavirus, contains an element critical for viral RNA encapsidation"Journal of Virology. 77. 3542-3548 (2003)

J.Sasaki、K.Taniguchi：“爱知病毒（一种小核糖核酸病毒）基因组的 5 端序列包含对病毒 RNA 衣壳化至关重要的元件”《病毒学杂志》。

J.Sasaki, S.Nagashima, K.Taniguchi: "Aichi virus leader protein is involved in viral RNA replication and encapsidation."Journal of Virology. 77. 10799-108007 (2003)

J.Sasaki、S.Nagashima、K.Taniguchi：“爱知病毒前导蛋白参与病毒 RNA 复制和衣壳化。”病毒学杂志。

S.Nagashima, J.Sasaki, K.Taniguchi: "Functional analysis of the stem-loop structures at the 5' end of the Aichi virus genome."Virology. 313. 56-65 (2003)

S.Nagashima、J.Sasaki、K.Taniguchi：“爱知病毒基因组 5 端茎环结构的功能分析。”病毒学。