アイチウイルスのゲノム複製とencapsidationの分子機構

爱知病毒基因组复制和衣壳化的分子机制

• 批准号: 16790275
• 负责人: 佐々木 潤
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790275/
• 关键词: ピコルナウイルス; ゲノム複製; ステム-ループ構造; シュードノット構造; 非翻訳領域; ウイルスRNAの複製

アイチウイルスは急性胃腸炎関連のピコルナウイルスである。本研究はアイチウイルスゲノム5'および3'非翻訳領域の、ウイルスRNA複製とencapsidationにおける役割を明らかにすることを目的としている。本年度はウイルス複製におけるゲノム3'非翻訳領域の役割の解析およびゲノム5'末端領域と相互作用するタンパク質の探索を行った。3'非翻訳領域の様々な部位に欠失変異を導入したレプリコンを作成し、培養細胞での複製能を解析した結果、3'非翻訳領域がゲノムRNAの複製に必須であることが示された。さらに無細胞ウイルス産生システムを利用した解析により、3'非翻訳領域の欠失がマイナス鎖合成効率を低下させること、また、プラス鎖RNAの合成は開始されるものの、完全長プラス鎖RNAが合成されないことが明らかになった。一方、ゲルシフトアッセイおよびノースウェスタン解析により、ゲノム5'末端領域と相互作用するタンパク質として、ウイルスタンパク質3ABCおよび約80kDaの宿主タンパク質を見出した。マイナス鎖合成を妨げる変異を導入したRNAをプローブとして用いた場合には、これらのタンパク質との結合効率は低下した。ポリオウイルスの3ABタンパク質はゲノム5'末端と相互作用することが報告されているが、アイチウイルスの場合、結合能は認められなかった。また、80kDa宿主タンパク質に関しても、ポリオウイルスのゲノム5'末端と相互作用する宿主タンパク質PCBP2とは分子量が異なっていた。以上の結果は、本ウイルス独自の複製機構を示唆するものである。

Youdaoplaceholder0 ア チウ ス ス ス ス acute gastroenteritis associated with ア ピコ ナウ ナウ スである スである スである スである. This study は ア イ チ ウ イ ル ス ゲ ノ ム 5 'お よ び 3' non turn の 訳 field, ウ イ ル ス RNA replication と encapsidation に お け る "を cut Ming ら か に す る こ と を purpose と し て い る. This year は ウ イ ル ス copy に お け る ゲ ノ ム 3 'cut not turn の 訳 field service の parsing お よ び ゲ ノ ム 5' terminal areas と interaction す る タ ン パ ク mass line の explore を っ た. 3 'not turn 訳 field の others 々 な parts に owe - vision loss を import し た レ プ リ コ ン を make し, culture cell で の can replicate を parsing し, 3' た results of double 訳 field が ゲ ノ の ム RNA replication に must で あ る こ と が shown さ れ た. さ ら に cell free ウ イ ル ス produce シ ス テ ム を using し た parsing に よ り, 3 'の owe not turn 訳 field loss が マ イ ナ ス lock synthetic working rate low を さ せ る こ と, ま た, プ ラ ス の lock RNA synthesis は began さ れ る も の の, long completely プ ラ ス が lock RNA synthesis さ れ な い こ と が Ming ら か に な っ た. Side, ゲ ル シ フ ト ア ッ セ イ お よ び ノ ー ス ウ ェ ス タ ン parsing に よ り, ゲ ノ ム 5 'terminal area と interaction す る タ ン パ ク qualitative と し て, ウ イ ル ス タ ン パ ク qualitative 3 ABC お よ び about 80 kda の host タ ン パ ク qualitative を shows し た. マ イ ナ ス lock synthetic を hinder げ る - different を import し た RNA を プ ロ ー ブ と し て in い た occasions に は, こ れ ら の タ ン パ ク qualitative と の combined with low working rate は し た. ポ リ オ ウ イ ル ス の 3 ab タ ン パ ク qualitative は ゲ ノ ム 5 'end と interaction す る こ と が report さ れ て い る が, ア イ チ ウ イ ル ス の occasions, the binding energy は recognize め ら れ な か っ た. ま た, 80 kda host タ ン パ ク qualitative に masato し て も, ポ リ オ ウ イ ル ス の ゲ ノ ム 5 'end と interaction す る host タ ン パ ク qualitative PCBP2 と は が different molecular weight な っ て い た. The above <s:1> results ス and this ウ ウ ス ス ス ス are independently replicated by を and する <s:1> である である.

项目成果

The 5'-terminal region of the Aichi virus genome encodes cis-acting replication elements required for positive- and negative-strand RNA.

爱知病毒基因组的 5 末端区域编码正链和负链 RNA 所需的顺式作用复制元件。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Virology (In press)
• 作者: Shigeo Nagashima;Jun Sasaki;Koki Taniguchi
• 通讯作者: Koki Taniguchi