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アイチウイルスの複製に関与するウイルスタンパク質および宿主タンパク質の機能解析

爱知病毒复制涉及的病毒和宿主蛋白的功能分析

基本信息

批准号：
18790328
负责人：
佐々木潤
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790328/
关键词：
アイチウイルス複製複合体ピコルナウイルスゲノム複製

项目摘要

アイチウイルスは、胃腸炎関連のピコルナウイルスである。本研究は、アイチウイルス複製複合体形成に関わるタンパク質や複製複合体中でのタンパク質の役割を明らかにすることを目的とする。今年度は 1)非構造タンパク質の一つ、L タンパク質の機能解析、2)哺乳類ツーハイブリッドシステムを利用した非構造タンパク質同志の相互作用解析を行った。1)L タンパク質の機能解析:我々はこれまでに、L タンパク質がポリプロテインの一部として存在している間に、複製複合体形成のために重要な働きをしている可能性を示した。今年度はこの可能性を検討する目的で、L タンパク質がプロセッシング前のポリプロテインの細胞内局在におよぼす影響を調査した。その結果、L を含むポリプロテインは、感染細胞におけるゲノム複製部位の局在と類似して、細胞質にdot 状に存在した。一方、L を含まないポリプロテインは、細胞質の核周囲に存在したが、dot は形成しなかった。以上の結果は、L タンパク質は翻訳直後、ポリプロテインの一部として存在している間にポリプロテインの細胞内局在を決定し、複製複合体形成を効率良く導いていることを示唆する。2)非構造タンパク質同志の相互作用解析:哺乳類ツーハイブリッドシステムを利用して、アイチウイルスの非構造タンパク質とその切断中間産物L、2A、2B、2BC、2C、3A、3AB、3C、3CD、3Dの全ての組み合わせの相互作用を検討した。その結果、5つのタンパク質におけるホモニ量体形成、24ペアのヘテロ二量体形成を観察した。今回調べたタンパク質の全てが、少なくとも一種類と相互作用を示した。検出された相互作用には、他のピコルナウイルスでは確認されていない組み合わせも含まれていた。今後、検出された各相互作用について、複製複合体形成やウイルス複製における意義を調査する考えである。

アイチウイルスは、胃肠炎关连のピコルナウイルスである。The purpose of this study is to clarify the role of the replicator in the formation of replicator complexes. This year, 1) the analysis of non-structural properties, 2) the analysis of non-structural homosexual interactions in mammals. 1) Functional analysis of L-type substance: the existence of part of L-type substance and the possibility of replication complex formation are shown. This year's study aims to investigate the effects of different types of protein on the intracellular structure of the protein. As a result, L contains a lot of information about the replication site of infected cells. The site is similar to the cytoplasm. A square, L, contains the nucleus, cytoplasm, nucleus, nucleus, nucleus and nucleus. The results above indicate that the intracellular structure of the protein is determined by the presence of a part of the protein after the protein is inverted, and the formation rate of the replication complex is good. 2)Analysis of the interaction of non-structural homosexuality: The interaction of all components of cleavage intermediates L, 2A, 2B, 2BC, 2C, 3A, 3AB, 3C, 3CD, 3D of mammalian non-structural homosexuality is discussed. The results show that 5 kinds of particles are formed, 24 kinds of particles are formed. Now the correction of the quality of the whole, less than one kind of interaction The interaction between the two groups is confirmed by the interaction between the two groups. In the future, we will investigate the significance of each interaction and replication complex formation.