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下部食道括約部(LES)に発現する新規コラーゲン分子に関する研究

食管下端括约肌（LES）表达的新型胶原蛋白分子的研究

基本信息

批准号：
14770237
负责人：
住吉秀明
金额：
$ 2.05万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

1)特異的抗体作製と免疫組織染色。XIX型コラーゲンのN末端側とC末端側の非コラーゲンドメインのcDNAよりGST融合タンパク質を作製し、それぞれから抗原に対して十分な力価を持つモノクローナル抗体とポリクローナル抗体を作製した。この抗体を用いてマウス20〜30匹分の脳組織からのコラーゲン抽出物に対するウエスタンブロットを行ったところ、XIX型コラーゲンのバンドが検出され、KOマウスではこれが欠損していることを確認した。しかしながら組織切片に対する免疫租織染色及び免疫電顕染色において、十分な染色性を持つ抗体はまだ得られていない。原因として、XIX型コラーゲンの発現量が低いため検出限界を下回ってることが考えられる。現在、より力価の高い抗体をスクリーニングすることと、検出感度を上げる試みを行っている。2)透過型電子顕微鏡による観察生後1年を経過するKOマウスの下部食道括約部を透過型電子顕微鏡で観察したところ、平滑節細胞間の基底膜層に乱れたコラーゲン線維が増生し、平滑筋同士の接着が損なわれていた。この線維化は食道拡張を起こしていないKOマウスにも見られたが健常マウスには見られなかった。さかのぼって出生直後りKOマウスの観察では線維化は起こっておらず、著明を変化はまだ見られなかったがKOマウスでは平滑筋の基底膜層の間隙が健常マウスと比べ若干拡がっている傾向がみられた。

The main results are as follows: 1) specific antibodies were stained with immune tissue. XIX type antigens, antibodies, antigens, antibodies, antibodies. The antibodies were detected in the tissue samples of 20 minutes and 30 minutes. The samples were extracted from the tissue, the antibodies were detected, the antibodies were detected in The tissue sections were stained by immunorrent tissue staining and immuno-electrophoretic staining, and the antibodies were not detected by immunostaining. The reason is that the quantity is low, the limit is out of the limit, the reason is that the XIX model is out of the limit, and the reason is that the XIX model is out of bounds. Now, we need to know that the antibodies are high, the antibodies are high, and the sensitivity is very high. 2) one year after birth, the lower esophageal sphincter of the KO valve was examined by the scanning electron micrograph, the basement membrane of the intercellular membrane was disordered, and the smooth muscle was used to detect the disordered basement membrane.