Nurr1相互作用分子から迫るカテコールアミン合成酵素発現機構の解明

从 Nurr1 相互作用分子中阐明儿茶酚胺合酶的表达机制

基本信息

批准号：
14780586
负责人：
鈴木崇弘
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology (2003)Fujita Health University (2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780586/
关键词：
Tyrosine hydroxylase Nurr1 ATF-2 NGF MEK Tyrosine Hydroxylase

项目摘要

転写因子ATF-2は、Nurr1遺伝子発現調節領域に存在するcAMP応答配列(CRE)に結合することが報告されており、かつ神経の発達に重要であることが示唆されている。前年度の成果として、ATF-2は、チロシン水酸化酵素(TH)の遺伝子発現調節領域に存在するCREに作用して、THの発現誘導に関わることを示した。神経発達期に重要である神経成長因子(NGF)は、Nurr1の発現誘導とATF-2のリン酸化上昇の両方を引き起こすことから、本年度はNGFによるTHの発現誘導機構を解析した。PC12D細胞においてNGF刺激により誘導されるTH mRNA量の増大は、MEK阻害剤であるU0126で前処理することで抑制されたが、p38 MAPK、PI3K、およびPKAの阻害剤では抑制されなかった。また、ルシフェラーゼレポーターアッセイを行った結果、U0126は、NGFにより誘導されるTHプロモーター活性の上昇を抑制し、その濃度依存性はERK1/2リン酸化誘導の抑制と一致していた。野生型Rasおよび活性化型MEK1の一過性過剰発現によりTHプロモーター活性は上昇し、不活性化型Rasの過剰発現によりNGF刺激によるTHプロモーター活性の誘導は抑制された。さらに、NGFはTHプロモーターに存在するAP-1応答配列とcAMP応答配列(CRE)の両方に対してRas-MEK依存的な活性化を行っていた。以上の結果から、NGFによるTH発現誘導にはRas-MEK経路の活性化が必要であることが示され、この成果を論文として発表した。Ras-MEK経路は、ATF-2の転写活性を制御することが示唆されており、Ras-MEK経路によるATF-2およびNurr1の機能制御がTHの発現誘導に作用する可能性が考えられた。

据报道，转录因子ATF-2与Nurr1基因表达调节区域中存在的cAMP反应序列（CRE）结合，并被认为对神经发育很重要。上一年的结果，我们表明ATF-2作用于酪氨酸羟化酶基因表达调节区（Th）中的CRE，并参与TH表达的诱导。在神经发育阶段很重要的神经生长因子（NGF）引起Nurr1表达诱导和ATF-2的磷酸化增加，因此今年我们分析了NGF表达诱导Th表达的机制。通过用MEK抑制剂U0126预处理NGF刺激引起的NGF刺激诱导的TH mRNA水平升高，而不是通过p38 MAPK，PI3K和PKA的抑制剂来抑制。此外，荧光素酶报告基因测定法表明，U0126抑制了NGF诱导的启动子活性的增加，其浓度依赖性与抑制ERK1/2磷酸化诱导的抑制一致。野生型Ras和激活的MEK1的瞬时过表达增加了TH启动子活性，而灭活的RA的过表达抑制了NGF刺激诱导Th启动子活性的诱导。此外，NGF对TH启动子中存在的AP-1和CAMP响应序列（CRE）进行了RAS-MEK依赖性激活。以上结果表明，RAS-MEK途径的激活对于通过NGF诱导Th表达是必要的，并且该结果作为论文发表。已经提出RAS-MEK途径调节ATF-2的转录活性，并且认为通过RAS-MEK途径对ATF-2和Nurr1的功能调节可能会影响Th表达的诱导。