オオムギの統合的・革新的ゲノム機能解析

大麦的集成和创新基因组功能分析

• 批准号: 03F00111
• 负责人: 遠藤 隆
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00111/
• 关键词: オオムギ; コムギ; 染色体地図; EST; RHマッピング; 染色体断片系統

本研究は、コムギのオオムギ染色体断片系統とRHマッピング(radiation hybrid mapping)の手法を用いて、日本国内外で開発されているESTデータベースから得られるESTマーカーの物理的染色体地図を作成しようとするものである。この目的のために、本年度は、当初、オオムギ5H染色体の断片を有するパンコムギ系統のGISH (genomic in situ hybridization)法による二次選抜と系統確立までを目指したが、ESTデータの整備が急務であることが判明したので、以下のようにESTデータベースの整備を優先した研究を行った。1.GISHにより選抜された(一次選抜)構造変異5H染色体を有するパンコムギ約150系統の自家受精種子を得た。2.岡山大学資源生物科学研究所で開発されたESTマーカーの内、PCRによりオオムギでは増幅するがパンコムギでは増幅しない約1400のESTについて、岡山大学からPCRプライマーを分譲していただいた。3.これらのプライマーを用いてオオムギ染色体添加系統の全てについてPCR分析を行い、約700のESTについて、座乗するオオムギの染色体を確定することに成功した。5H染色体には108のESTマーカーが座乗していた。4.座乗染色体が決定したESTのマッピングと解析を行う前に、オオムギ380,000ESTデータベースを解析し、ESTクラスタリングを行い、ESTの重複を除いた。この作業には、京都大学化学研究所のスーパーコンピュータを利用させていただいた。5.このESTクラスタリングの後、現在、これらを各種の代謝経路に当てはめる研究を遂行中である。これにより特定の代謝経路に関与する遺伝子(EST)が物理的に染色体上配置されているかが明かになることが期待される。

This study aims to explore the application of radiation hybrid mapping in the development of EST in Japan and abroad. This year, we will conduct research on the identification of 5H chromosome fragments and the identification of EST fragments in order to prioritize EST preparation. 1. GISH selection (primary selection) structure of different 5H chromosomes, including about 150 systems of self-fertilized seeds 2. Okayama University Institute of Natural Resources and Biological Sciences has developed ESTs, PCR products, and PCR products. The PCR products have increased in size to approximately 1400 ESTs. Okayama University has developed PCR products. 3. PCR analysis of the chromosome addition system was successfully carried out in about 700 ESTs. 5H chromosome 108 EST 4. The locus chromosome is determined by EST analysis, EST duplication, EST analysis, EST analysis. This is the first time that I've ever been to Kyoto University. 5. After and now, research on various metabolic pathways is underway. This is the result of a physical chromosomal disposition of ESTs associated with specific metabolic pathways.