ブドウ球菌および腸球菌における薬剤耐性の蔓延に関する分子疫学的研究

葡萄球菌和肠球菌耐药发生率的分子流行病学研究

• 批准号: 03F00133
• 负责人: 小林 宣道
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00133/
• 关键词: 黄色ブドウ球菌; 腸球菌; 薬剤耐性; 消毒剤耐性; メチシリン耐性; アミノグリコシド耐性; テトラサイクリン耐性

本研究の対象とした黄色ブドウ球菌は1993年から2001年までに札幌医科大学医学部附属病院で分離された臨床分離株522株であった。今年度は消毒剤への耐性を賦与する、薬剤排出蛋白の遺伝子である消毒剤高度耐性遺伝子(qacA/qacB)、低度耐性遺伝子(smr)の分布と遺伝子学的多様性を解析した。qacA/qacB遺伝子はメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(MRSA)の32.6%、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌(MSSA)の7.5%に検出された。一方smr遺伝子の検出率はMRSA,MSSAで各々3.3%、5.9%と低かった。qacA/qacB遺伝子陽性菌株の中で、qacAは40.7%、qacBは59.3%を占めた。各遺伝子の保有菌株のうち代表的なものについて遺伝子配列を決定したところ、qacAは2種類、qacBは4種類の遺伝子型が同定された。またqacA,qacBの下流領域の遺伝子配列についても調べたところ、既報のものも含めて、qacAよりqacBにおいて多様な配列が見られた。これらより、qacAからqacBが分子進化を経て生成したと考えられる。腸球菌については1997〜1998年の2年間および2001年1-7月に札幌医科大学附属病院で分離された菌株約250株のほか、2002年10月から現在までの分離株約300株を対象とした。アミノグリコシド耐性遺伝子の分布については、高度ゲンタマイシン耐性に関与するaac(6')-aph(2")はE.faecalisで40.5%、E.faeciumで3.5%に検出された。黄色ブドウ球菌に分布し腸球菌では報告のない、ant(9)-IaがE.faecalis、E.faecium、E.aviumに各1株づつより検出され、それらの遺伝子配列は黄色ブドウ球菌のそれに完全に一致していた。テトラサイクリン耐性遺伝子は、tetMがE.faecalisで75.2%,E.faeciumで71.7%と高い検出率を示した。Streptococcus pyogenesでのみ報告のあるtetTがE.faecalis5株に検出され、その遺伝子配列はS.pyogenesのそれにきわめて似ていたが、4塩基(4アミノ酸)の違いがあった。tetS、tetOは腸球菌に存在することは知られていたが、その遺伝子配列と多様性は明らかではない。今回E.faecalisで検出されたtetS遺伝子は、Listeria monocytogenesにおけるそれと全く同じ配列を、tetO遺伝子は既報のtetOを加えても遺伝子配列の多様性が多く見られた。今後これら耐性遺伝子が腸球菌へ拡大した機序について遺伝子学的観点から考察する予定である。

In this study, 522 clinical isolates were isolated from Sapporo Medical University Hospital since 1993. This year, we analyzed the diversity of the distribution and genetics of highly resistant (qacA/qacB) and low-resistant (smr) genes in disinfectant resistance and protein excretion. qacA/qacB strains were detected in 32.6% of MRSA and 7.5% of MSSA. The detection rates of MRSA and MSSA were 3.3% and 5.9% respectively. qacA/qacB gene positive strains accounted for 40.7% and 59.3% respectively. The genetic diversity of each strain is determined by the genetic diversity of the two species, qacA and qacB. QacA,qacB and the downstream domain of the original sub-array are arranged in the middle of the adjustment, both reported and contained in the end, qacA and qacB are arranged in the middle of the multiple array. QacA, qacB, molecular evolution, molecular evolution. About 250 strains of Enterococcus were isolated from Sapporo Medical University Affiliated Hospital during the two years from 1997 to 1998, and about 300 strains were isolated from October 2002. The distribution of E.faecalis and E.faecium was 40.5% and 3.5% respectively. The distribution of Enterococcus flavus was identical to that of E.faecalis, E.faecium and E.avium. E. faecalis 75.2%, E. faecium 71.7%, and high detection rate. Streptococcus pyogenes is reported to be 5 strains of E. faecalis, and S.pyogenes is reported to be 5 strains of E. faecalis. tetS, tetO, and Enterococcus species exist, and they are diverse. Now, E.faecalis has been found to be tetS, Listeria monocytogenes, tetO, tetO. In the future, the mechanism of resistance to enterococci should be investigated.

项目成果

Kobayashi N, Alam MM, Ishino M.: "Genomic diversity of antiseptic resistance genes in staphylococci. Recent Research Developments in Antimicrobial Agents & Chemotherapy."Research Signpost(in press). (2004)

Kobayashi N、Alam MM、Ishino M.：“葡萄球菌中抗菌素耐药性基因的基因组多样性。抗菌药物的最新研究进展

Alam MM, et al.: "Genomic diversity of high-level antiseptic resistance genes qacA and qacB in human clinical isolates of Staphylococcus aureus"Microbial Drug Resistance. 9. 109-121 (2003)

Alam MM 等人：“金黄色葡萄球菌人类临床分离株中高水平抗菌素耐药性基因 qacA 和 qacB 的基因组多样性”微生物耐药性。

Alam MM, et al.: "Analysis on genomic diversity and evolution of low-level antiseptic esistance gene smr in Staphylococcus aureus."Microbial Drug Resistance. 9 Suppl. 1. 1-7 (2003)

Alam MM 等人：“金黄色葡萄球菌低水平抗菌耐药基因 smr 的基因组多样性和进化分析。”微生物耐药性。