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肥満ラットの肝臓および肥満組織の脂質代謝における共役リノール酸の影響

共轭亚油酸对肥胖大鼠肝脏及肥胖组织脂质代谢的影响

基本信息

批准号：
03F03117
负责人：
柳田晃良
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Saga University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03117/
关键词：
肥満ラット脂質代謝共役リノール酸

项目摘要

肥満モデルラットの脂肪組織における遺伝子発現プロファイリングを行うことで、共役リノール酸の栄養生理機能について分子栄養学的解析を試みた。即ち、OLETFラットの内蔵脂肪組織から、TRIzol Reagent (Invitrogen)を用いて、Total RNAを抽出した。Serial Analysis of Gene Expression (SAGE)解析は、I-SAGE kit (Invitrogen)を用いて発現遺伝子由来の17 bp Sequence Tagsを作成し、数珠状につないだTagをpZErO-1 vectorに組み込んで大腸菌に導入し、Zeocin耐性寒天培地上に生育したポジティブコロニーを選んでplasmidを精製した。精製した各plasmid中のクローニングサイトのDNA塩基配列は、シングルパスシークエンス(日立計測器サービス)により塩基配列の解析を行った。得られたシークエンスデータは、米国National Institute of Healthが保有するデータベース(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SAGE)とのマッチングにより同定を行った。肥満抑制作用と脂質低下作用が認められた10t,12c-CLA摂食群について、Control群を対照として遺伝子発現プロファイリングを行った。それぞれ、450クローンずつDNA塩基配列解析を行い、2655種類の転写産物について12512個(Control群)と12234個(10t,12c-CLA群)のsequence tagを検出した。しかしながら、転写産物の高発現上位50種(3595tags)のうち、14種(1499tags)について未同定のsequence tagであった。また未同定のsequence tagは、全部で683種あった。これらは、SAGE mapに登録されていない脂肪組織特異的に発現している転写産物群であると考えられるため、今後はsequence tagをプローブとしてcDNAをクローニングし、転写産物の同定を行う事が急務であると考えられた。本研究により、発現変動したtagの中から共役リノール酸に応答する新規分子の発見が期待される。

The analysis of molecular nutrition in the physiological function of fatty acids was studied. This means that OLETF and TRIzol Reagent (Invitrogen) are used to extract Total RNA. Serial Analysis of Gene Expression (SAGE) analysis, I-SAGE kit (Invitrogen) was used to generate 17 bp Sequence Tags of gene origin, number of beads, tag, pZErO-1 vector, group, E. coli, introduction, Zeocin tolerance, cold culture, fertility, selection, plasmid refinement. The DNA base alignment of each plasmid was refined and analyzed. The National Institute of Health of the United States (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SAGE) has been working on the same issue. The effect of fat inhibition and lipid lowering is recognized by the 10t,12c-CLA food group, the Control group, and the development of the protein. Among the 2655 types of DNA sequences, 12512 (Control group) and 12234 (10t, 12c-CLA group) sequence tags were detected. 50 species (3595tags) and 14 species (1499tags) are not identical sequence tags.また未同定のsequence tagは、全部で683种あった。The SAGE map is registered in the subcutaneous fat-specific discovery and development of the product group. This study is aimed at exploring the development of new molecular mechanisms for the identification of active and reactive species.