非ペプチド抗原によるガン細胞標識とγδ型T細胞による認識機構の解明とその臨床応用

γδT細胞の抗原は細菌成分由来のリン酸抗原や、骨粗鬆症治療薬として知られるビスフォスフォネート抗原などの非ペプチド性抗原であることが知られている。申請者は、現在までに非ペプチド性抗原を処理したヒトがん細胞によって、γδT細胞が特異的に活性化されることを示してきた。今回、この処理した非ペプチド性抗原が、がん細胞表面上に提示されているかを検討した。まず、細胞内への抗原の取り込みが必須条件かどうかを検討するため、温度変化、あるいは、パラホルムアルデヒドによる固定処理を行い抗原処理し、γδT細胞の活性化を検討した。結果、ヒト膀胱がん細胞に対し、37℃でビスフォスフォネート抗原処理した場合ではがん細胞はγδT細胞の強い活性化を誘導できるが、4℃で処理したがん細胞、あるいは、パラホルムアルデヒドで固定処理したがん細胞に対しては、全く活性化誘導できなかった。ここからビスフォスフォネート抗原は、細胞内への取り込みにより副次的に抗原性が生まれ、直接は提示されていないことが示された。次に、リン酸抗原においても同様の実験を行ったところ、37℃で処理した場合に比べ、4℃処理した場合、あるいは、パラホルムアルデヒドによる固定処理したがん細胞に対しては、逆にγδT細胞の高い反応性が見られた。ここから、リン酸抗原は、ビスフォスフォネート抗原とは異なり、ヒトがん細胞表面上にリン酸抗原が結合していることが示唆された。更に、RI標識化抗原の100倍濃度のRI非標識化リン酸抗原を同時に処理したところ、値が抑えられたことから、この結合は特異的であることが示され、リン酸抗原提示分子がヒトがん細胞表面上に存在することが示唆された。

γδT細胞の抗原は細菌成分由来のリン酸抗原や、骨粗鬆症治療薬として知られるビスフォスフォネート抗原などの非ペプチド性抗原であることが知られている。申請者は、現在までに非ペプチド性抗原を処理したヒトがん細胞によって、γδT細胞が特異的に活性化されることを示してきた。今回、この処理した非ペプチド性抗原が、がん細胞表面上に提示されているかを検討した。まず、細胞内への抗原の取り込みが必須条件かどうかを検討するため、温度変化、あるいは、パラホルムアルデヒドによる固定処理を行い抗原処理し、γδT細胞の活性化を検討した。結果、ヒト膀胱がん細胞に対し、37℃でビスフォスフォネート抗原処理した場合ではがん細胞はγδT細胞の強い活性化を誘導できるが、4℃で処理したがん細胞、あるいは、パラホルムアルデヒドで固定処理したがん細胞に対しては、全く活性化誘導できなかった。ここからビスフォスフォネート抗原は、細胞内への取り込みにより副次的に抗原性が生まれ、直接は提示されていないことが示された。次に、リン酸抗原においても同様の実験を行ったところ、37℃で処理した場合に比べ、4℃処理した場合、あるいは、パラホルムアルデヒドによる固定処理したがん細胞に対しては、逆にγδT細胞の高い反応性が見られた。ここから、リン酸抗原は、ビスフォスフォネート抗原とは異なり、ヒトがん細胞表面上にリン酸抗原が結合していることが示唆された。更に、RI標識化抗原の100倍濃度のRI非標識化リン酸抗原を同時に処理したところ、値が抑えられたことから、この結合は特異的であることが示され、リン酸抗原提示分子がヒトがん細胞表面上に存在することが示唆された。