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タンパク質の腸管吸収と食物アレルギー発症の分子機構

蛋白质肠道吸收和食物过敏发生的分子机制

基本信息

批准号：
03J50431
负责人：
松原毅
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

タンパク質を経口摂取してから食物アレルギーを発症するまでには、タンパク質の消化管内から体内への取込み、体内の免疫器官における抗原提示とIgE産生、マスト細胞表面に結合したIgEが再度摂取した抗原タンパク質で架橋されることにより誘導されるマスト細胞の脱顆粒、といった様々な過程を経る。本研究では、腸管におけるタンパク質の体内への吸収経路を明らかにする事、また、マスト細胞の脱顆粒誘導の引き金となる抗原とIgE抗体の架橋形成を質的、量的に解析する事を目的として以下の実験を行った。タンパク質の輸送経路を知る手がかりを探るために、卵アルブミン(OVA)をマウスに胃内投与後、門脈血および末梢血へ移行したOVAの電荷について二次元電気泳動法により解析した。その結果、OVAは血液中へ移行する過程で荷電の変化を伴う分子修飾を受けることが明らかになった。標準OVAをウシ腸上皮アルカリホスファターゼで脱リン酸化した場合にほぼ同様な荷電の変化が観察されることから、OVAが腸管で吸収される際に脱リン酸化を受けると予想した。OVAの腸管吸収におけるリン酸基の影響を調べるために、標準OVAまたは脱リン酸化処理したOVAを胃内投与した後、末梢血に移行したOVAを定量した結果、脱リン酸化処理による有意な低下が観察された。このことから、消化管におけるリン酸化タンパク質の吸収にはリン酸基を介する経細胞輸送機構が存在することが示唆された。アトピー性皮膚炎のモデルマウスと知られるNC/Ngaマウスの脾細胞を用いて作製した4クローンのモノクローナルIgEの抗原を、環境抗原および自己抗原についてWesternblot解析により探索した。その結果、1クローン(9E4)がヒストンH3に結合することが明らかになった。

The process of antigen prompt, IgE production, IgE binding to cell surface, IgE re-acquisition, antigen bridging, induction, degranulation, and immune organ detection in the digestive tract and in the immune organs of the body. The aim of this study is to clarify the role of degranulation and antigen and IgE antibody bridge formation in intestinal tract and intestinal tract. The transport pathway of the substance in the stomach is detected by two-dimensional electrokinetic analysis (OVA). As a result, the process of OVA migration in the blood is characterized by changes in charge and molecular modifications. The standard intestine epithelium was isolated and acidified. The same charge was observed when the intestine was absorbed. The effect of OVA on the absorption and acidification of the intestine was investigated. The presence of cellular transport mechanisms in the digestive tract Western blot analysis of allergens, environmental antigens, and self antigens in spleen cells from patients with acute dermatitis The result is that the 1 st floor (9E4) is the same as the 1 st floor (9E4).