鳥類で見出された新規視床下部ホルモンGnIHのレセプターの同定と作用機序の解析

鸟类新型下丘脑激素GnIH受体的鉴定及其作用机制分析

• 批准号: 15770040
• 负责人: 浮穴 和義
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770040/
• 关键词: 新規視床下部ペプチド; 脳下垂体ホルモン; ゴナドトロピン; ゴナドトロピン放出抑制ホルモン; ペプチドレセプター; cDNAクローニング; レセプター結合実験; 鳥類

我々は、鳥類のウズラの脳からRFamide抗体免疫陽性物質の単離・同定を試みた結果、12アミノ酸残基からなる新規ペプチドを同定することに成功した。詳しく解析したところ、このペプチドは正中隆起外層に終末する視床下部室傍核ニューロンに局在しており、生殖腺刺激ホルモンの放出を抑制することが分かった。これは脊椎動物から初めて見出されたものであり、生殖腺刺激ホルモン放出抑制ホルモン(Gonadotropin-inhibitory hormone ; GnIH)と名付けた。in vivoとin vitroの最近の解析から、GnIHは、脳下垂体細胞に直接作用して生殖腺刺激ホルモンの放出を抑制する経路と、生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン(GnRH)の作用を抑制することによる間接作用の2つの作用経路の存在が示唆された。GnIHの作用機序を明らかにするためには、GnIHレセプターの同定が必要不可欠である。本研究では、哺乳類のレセプター遺伝子の情報をもとに、鳥類のウズラにおけるGnIHのレセプターを同定することを試みた。哺乳類GnIH同族ペプチドのレセプタータンパク質のアミノ酸配列に基づき、縮重プライマーを作製し、視床下部組織を用いて、GnIHレセプターのcDNAの単離を行った。その結果、GnIHレセプターと思われる7回膜貫通型レセプターのクローニングに成功した。次に、クローニングされたレセプターがGnIHのレセプターであるかを確認するために、クローニング出来たレセプターを培養細胞に強制発現させてレセプター結合実験を行い結合親和性を解析した。その結果、GnIHレセプターであることが確認された。このGnIHレセプターmRNAは、脳下垂体と視床下部領域に発現していた。これらの結果から、GnIHの脳下垂体への直接作用と視床下部への間接作用が初めて示された。

The results of the identification of RFamide antibody immunopositive substances in birds and birds and the identification of new RFamide antibody immunopositive substances in birds and birds were successful. In detail, it is analyzed that the outer layer of the median eminence is terminated by the lower part of the optic bed, and the release of gonad stimulation is inhibited. In vertebrates, Gonadotropin-inhibitory hormone (GnIH) is the name given to Gonadotropin-inhibitory hormone. Recent analysis of in vivo and in vitro shows that GnIH inhibits gonadal stimulation of pituitary cells directly and inhibits gonadal stimulation of GnRH (GnRH). GnIH's mechanism of action is clearly defined. This study is aimed at identifying information about mammals and birds. Mammalian GnIH isoforms are selected from the group consisting of base, contraction, hyporetinal tissue and cDNA. As a result, GnIH has successfully completed the 7-loop film penetration test. In addition, the binding affinity analysis was carried out in cultured cells under stress. Results, GnIH The GnIH mRNA was found in the lower part of the pituitary gland and optic bed. As a result, GnIH has a direct effect on the pituitary gland and an indirect effect on the lower part of the optic bed.

项目成果

Gonadotrophin inhibitory hormone depresses gonadotrophin α and follicle-stimulating hormone β subunit expression in the pituitary of the domestic chicken

• DOI: 10.1111/j.1365-2826.2005.01260.x
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: JOURNAL OF NEUROENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Ciccone, NA;Dunn, IC;Sharp, PJ
• 通讯作者: Sharp, PJ

Melatonin induces the expression of gonadotropin-inhibitory hormone in the avian brain

• DOI: 10.1073/pnas.0403840102
• 发表时间: 2005-02-22
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Ubuka, T;Bentley, GE;Tsutsui, K
• 通讯作者: Tsutsui, K

K.Tsutsui: "A novel aspect of the cerebellum : Biosynthesis of neurosteroids in the Purkinje cell (Review)."Cerebellum. 2. 215-222 (2003)

K.Tsutsui：“小脑的一个新方面：浦肯野细胞中神经类固醇的生物合成（评论）。”小脑。

7α-Hydroxypregnenolone acts as a neuronal activator to stimulate locomotor activity of breeding newts by means of the dopaminergic systems.

7α-Hydroxypregnenolone 作为神经元激活剂，通过多巴胺能系统刺激繁殖蝾螈的运动活动。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 101
• 作者: Ukena K. et al.;Yin H.et al.;Ubuka T. et al.;Matsunaga M. et al.
• 通讯作者: Matsunaga M. et al.

M.Matsunaga: "Identification of 3beta,5beta-tetrahydroprogesterone, a progesterone metabolite, and its stimulatory action on preoptic neurons in the avian brain."Brain Res.. (In press). (2004)

M.Matsunaga：“3β,5β-四氢孕酮（一种孕酮代谢物）的鉴定及其对禽类大脑视前神经元的刺激作用。”Brain Res..（正在出版）。