ノックアウトマウスを用いた基本転写伸長因子の生理機能の解明
ノックアウトマウスを用いた基本転写伸長因子の生理機能の解明
使用基因敲除小鼠阐明基本转录延伸因子的生理功能
批准号：
15770107
负责人：
山口 雄輝
金额：
$1.92万
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2003 至 2004
中文摘要
翻译
NELFはRNAポリメラーゼIIによる転写伸長を抑制することが知られる唯一の因子である.NELFの個体レベルでの機能を明らかにするため,NELFの4つのサブユニットのうち2つの遺伝子を破壊したマウスを作製した.NELF-E欠損マウスは一見正常に誕生し生育した.一方,NELF-A欠損マウスはE10.5以前で耐性致死となった.よく調べたところ,NELF-E欠損マウスはNELF-EのC末端側の約2/3を欠損したトランケート型タンパク質を発現していた.このC末端部分には,機能的に重要と考えていたRNA結合ドメインRRMが含まれる.NELF-Eの欠損がnullでないため断定はできないものの,以上の結果は,個体レベルでの生存に関してNELFの2つのサブユニットが対照的な要求性を示すという予想外の可能性を示した.NELF-A欠損マウスについて詳しく調べたところ,E8.5の段階で-/-変異体がメンデル律に則って見つかった.ただし,それらは一見するとE6.5に相当するような小さな胚(あるいは吸収途中と思われる残骸組織)であり,組織学的解析もそれを裏付けた.in situハイブリダイゼーションの結果によれば,NELF-Aは少なくともE8.5以降の段階で様々な組織に発現していた.以上の結果はNELFの要求性が極めて発生段階特異的に現れることを示しており,大変興味深い.そもそもNELFは転写を普遍的に制御する因子として我々が同定した.初期発生の過程で転写は2細胞期から始まっているわけだが,NELF-Aがなくても着床(E4.5)まで問題なく進み,E6.5あたりで突如として発達遅滞が引き起こされるという今回の結果は,我々にとって意外であり,NELFの遺伝子特異的な働きを明確に示すものと考えている.
英文摘要
NELFはRNAポリメラーゼIIによる転写伸長を抑制することが知られる唯一の因子である.NELFの個体レベルでの機能を明らかにするため,NELFの4つのサブユニットのうち2つの遺伝子を破壊したマウスを作製した.NELF-E欠損マウスは一見正常に誕生し生育した.一方,NELF-A欠損マウスはE10.5以前で耐性致死となった.よく調べたところ,NELF-E欠損マウスはNELF-EのC末端側の約2/3を欠損したトランケート型タンパク質を発現していた.このC末端部分には,機能的に重要と考えていたRNA結合ドメインRRMが含まれる.NELF-Eの欠損がnullでないため断定はできないものの,以上の結果は,個体レベルでの生存に関してNELFの2つのサブユニットが対照的な要求性を示すという予想外の可能性を示した.NELF-A欠損マウスについて詳しく調べたところ,E8.5の段階で-/-変異体がメンデル律に則って見つかった.ただし,それらは一見するとE6.5に相当するような小さな胚(あるいは吸収途中と思われる残骸組織)であり,組織学的解析もそれを裏付けた.in situハイブリダイゼーションの結果によれば,NELF-Aは少なくともE8.5以降の段階で様々な組織に発現していた.以上の結果はNELFの要求性が極めて発生段階特異的に現れることを示しており,大変興味深い.そもそもNELFは転写を普遍的に制御する因子として我々が同定した.初期発生の過程で転写は2細胞期から始まっているわけだが,NELF-Aがなくても着床(E4.5)まで問題なく進み,E6.5あたりで突如として発達遅滞が引き起こされるという今回の結果は,我々にとって意外であり,NELFの遺伝子特異的な働きを明確に示すものと考えている.
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Wu et al.: "NELF and DSIF cause promoter proximal pausing on the hsp70 promoter in Drosophila"Genes and Development. 17・11. 1402-1414 (2003)
Wu 等人：“NELF 和 DSIF 导致果蝇中 hsp70 启动子的启动子近端暂停”，Genes and Development 17·11（2003）。
Wu 等人：“NELF 和 DSIF 导致果蝇中 hsp70 启动子的启动子近端暂停”，Genes and Development 17·11（2003）。
DOI：
--
发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
Ainbinder et al.: "Elongation inhibition by DSIF is regulated by the A20 promoter via a novel negative element and NF-κB"Molecular and Cellular Biology. (in press). (2004)
Ainbinder 等人：“DSIF 的伸长抑制是由 A20 启动子通过新型负元件和 NF-κB 调节的”《分子和细胞生物学》（2004 年出版）。
Ainbinder 等人：“DSIF 的伸长抑制是由 A20 启动子通过新型负元件和 NF-κB 调节的”《分子和细胞生物学》（2004 年出版）。
DOI：
--
发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
DOI：
10.1128/mcb.25.1.512-522.2005
发表时间：
2005-01-01
期刊：
MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
影响因子：
5.3
作者：
[Kabe, Y, Yamada, J, Handa, H]
通讯作者：
Handa, H
Endou et al.: "Human Spt6 stimulates transcription elongation by RNA polymerase II in vitro"Molecular and Cellular Biology. (in press). (2004)
Endou 等人：“人 Spt6 在体外通过 RNA 聚合酶 II 刺激转录延伸”分子和细胞生物学。
Endou 等人：“人 Spt6 在体外通过 RNA 聚合酶 II 刺激转录延伸”分子和细胞生物学。
DOI：
--
发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
DOI：
10.1128/mcb.24.14.6298-6310.2004
发表时间：
2004-07-01
期刊：
MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
影响因子：
5.3
作者：
[Oshima, S, Nakamura, T, Watanabe, M]
通讯作者：
Watanabe, M
共 10 条
多因子複合体を解析可能な新手法を用いた転写伸長・終結複合体の構造機能解析
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批准号：24K02003
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项目类别：Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额：$11.9万
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财政年份：2024
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负责人：山口 雄輝
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依托单位：
生細胞内(insitu)でタンパク質間の相互作用を解析・同定する新規な方法の開発
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批准号：18770148
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项目类别：Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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资助金额：$2.3万
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财政年份：2006
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负责人：山口 雄輝
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依托单位：
RNAポリメラーゼ2による転写伸長反応制御の分子機構
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批准号：99J06444
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项目类别：Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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资助金额：$1.54万
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财政年份：1999
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负责人：山口 雄輝
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依托单位：
海外基金