ヌクレオシドトランスポーターと抗腫瘍性ヌクレオシドに対する感受性との関連性

核苷转运蛋白与抗肿瘤核苷敏感性的关系

• 批准号: 15790071
• 负责人: 小幡 徹
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790071/
• 关键词: ヌクレオシドトランスポーター; 抗腫瘍性ヌクレオシド; 薬剤感受性

抗腫瘍性ヌクレオシドはヌクレオシドトランスポーター(NT)によって細胞内に輸送される。本研究では、薬剤感受性とNT機能の関連性を検討した。培養がん細胞では促進拡散輸送系(ENT)1-3のmRNAは恒常的にその発現が観察されたが、ENT4は特に大腸がん細胞株で高頻度に発現が観察された。能動的輸送系(CNT)は組織特異性や恒常的発現などは観察されず、ENTに比較して低発現であった。また、8種類のヒトがん細胞を用い、抗腫瘍性ヌクレオシドの薬剤感受性と薬剤輸送量を検討した結果、NTのmRNAの発現量とヌクレオシドの細胞内輸送量に関連性は認められなかった。しかしながら、NTの阻害剤を用いて細胞内輸送量を制限すると、薬剤感受性が低下し、細胞内輸送量と薬剤感受性との間に明らかな関連性が認められた。更に薬剤感受性との関連性をより明確にするためにGFPとの融合蛋白質としてENT1-4を培養がん細胞株に強制発現させた結果、ENT1および2は従来までの報告通り細胞膜への局在性が観察された。しかしながら、ENT3および4は細胞膜上ではなく細胞内の小器官で発現が認められた。つまり、薬剤が細胞内に輸送された後の細胞内での分布に関与し、細胞膜での輸送活性や薬剤感受性には関与しないことが示唆された。そこで、強制発現細胞株での薬剤感受性を検討した結果、ENT1およびENT2の強制発現細胞株では薬剤の感受性が増強した。しかし、ENT3やENT4を発現した細胞株では薬剤の感受性に変化は認められなかった。ENT3およびENT4が細胞内小器官に発現し、そのヌクレオシドの輸送能にいかなる生物学的意義があるのかは不明ではあるが、抗腫瘍性ヌクレオシドの細胞内輸送(薬剤感受性)とは直接関係しないことが明らかとなった。これらの結果の一部は現在、論文として投稿準備中である。

Anti-tumor drug selection strategy is to select the appropriate drug selection strategy (NT) for intracellular drug delivery. This study explored the relationship between NT function and receptivity. In cultured cells, the mRNA expression of ENT1 -3 was detected at a constant rate, and ENT4 was detected at a high frequency in large intestine cell lines. The active transport system (CNT) is tissue-specific and has a constant appearance. The results showed that 8 kinds of NT mRNA expression and the intracellular drug delivery of anti-tumor drugs were related to the expression of NT mRNA. The relationship between the intracellular transport and the sensitivity of NT inhibitors is clearly identified. In addition, the relationship between GFP and fusion protein was clearly observed in the culture of ENT1 -4 cell lines under stress, ENT1 - 2 cell lines under stress, and the relationship between GFP and fusion protein was clearly observed in cell membrane. The small organs inside the cell are found on the cell membrane. The cellular distribution of a drug after its intracellular transport is related to its transport activity on the cell membrane and to its sensitivity. As a result of this study, the susceptibility of stress-emergent cell lines ENT1 and ENT2 increased. When ENT3 and ENT4 were discovered in the cell lines, their sensitivity to the drug changed and became clear. ENT3 and ENT4 are directly related to intracellular small organ development, cellular transport, and anti-inflammatory activity. The result of this paper is now in preparation.