筋緊張性ジストロフィーにおける白内障と性腺機能低下症の分子基盤解明

阐明强直性肌营养不良白内障和性腺功能减退症的分子基础

• 批准号: 15790155
• 负责人: 佐藤 滋
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790155/
• 关键词: 筋強直性ジストロフィー; 白内障; 性腺機能低下; 水晶体上皮; 子宮顆粒膜細胞; 転写制御; ホメオボックス; RNA結合タンパク質; 筋緊張性ジストロフィー; 発現プロファイリング

目的:水晶体上皮及び性腺由来培養細胞におけるSIX5標的遺伝子、標的分子の検索を行うことで、SIX5の発現量低下がどのような標的遺伝子の発現異常を引き起こし、細胞や組織の性質を変え、DM1における白内障と性腺機能低下症を引き起こすのか、その分子基盤の解明を目指す。結果:VP16の転写活性化ドメインを融合させた野生型SIX5、及び特異的DNA結合能を欠く変異型SIX5を水晶体上皮細胞、顆粒膜細胞で過剰発現させ、24時間後にRNAを抽出し、2種類のcDNAプローブを合成した。マイクロアレイを用いて野生型と変異型とで発現レベルが2倍以上異なる遺伝子を標的候補として同定した。水晶体上皮細胞で同定した227遺伝子には白内障との因果関係が示されている遺伝子(PITX3、TGFB2、KMO、GJA1)が含まれており、さらに水晶体透明度の維持に不可欠なイオンチャンネルやトランスポーターの遺伝子が複数含まれていた。顆粒膜細胞で同定した310遺伝子には性腺機能低下症との因果関係が示されている遺伝子((CYP19A1、ESR1、NRIP1、GATA4、BDNF)が含まれており、また性腺の形成や機能に関わる可能性の高い複数の遺伝子も含まれていた。10個以上の遺伝子についてRT-PCRによる検証実験を行い、アレイ解析で検出した発現レベルの変動パターンを確認した。こうした遺伝子の発現レベルを局所的に増減させ、白内障や性腺の機能を低下させるという機序が示唆された。また、Six5タンパク質がCCUGリピート(DM1と類似の症状を発症するDM2で伸長する)にin vitroで結合することを示し、SIX5がRNA結合能を持つ転写因子であることを明らかにした。SIX5はDM2においても白内障と性腺機能低下症の発症過程に関与する可能性が示唆された。

Objective: To investigate the expression of SIX5 target gene and target molecule in lens epithelial and gonadal derived cultured cells, to investigate the abnormal expression of SIX5 target gene, to investigate the changes in cell and tissue properties, to investigate the causes of cataract and hypogonadism, and to elucidate the molecular matrix. Results: VP16 gene expression was activated by fusion with wild-type SIX5 and specific DNA binding ability, and RNA was extracted and synthesized in lens epithelial cells and granular membrane cells after 24 hours. The wild type is more than twice as diverse as the wild type. Lens epithelial cells are identical to 227 genes, and the causal relationship between cataract and cataract is shown. The genes (PITX3, TGFB2, KMO, GJA1) include the following genes: The same 310 genes in granular membrane cells showed a causal relationship with hypogonadism. The genes (CYP19A1, ESR1, NRIP1, GATA4, BDNF) were highly likely to be involved in gonadogenesis and function. More than 10 RT-PCR probes are detected, detected, and detected. The mechanism of cataract gonadal function is shown in the following ways: SIX5 RNA binding energy is a factor of CCUG activity (DM1, DM2, DM3). SIX5 indicates the possibility of cataract and hypogonadism in DM2.

项目成果

Pigment cell lineage-specific expression activity of the ascidian tyrosinase-related gene.

• DOI: 10.1016/j.gene.2004.01.030
• 发表时间: 2004-05
• 期刊: Gene
• 影响因子: 3.5
• 作者: R. Toyoda;A. Kasai;Shigeru Sato;S. Wada;H. Saiga;K. Ikeo;T. Gojobori;T. Numakunai;Hiroaki Yamamoto

ホメオタンパク質とSixlと感覚器の形成

同源蛋白、Sixl 和感觉器官的形成

• 发表时间: 2004
• 期刊: 実験医学 22
• 作者: Toyoda;R;川上潔
• 通讯作者: 川上潔

Kumasaka, M., Sato, S., Yajima, I., Yamamoto, H.: "Isolation and developmental expression of tyrosinase family genes in Xenopus laevis."Pigment Cell Res. 16(5). 455-462 (2003)

Kumasaka, M.、Sato, S.、Yajima, I.、Yamamoto, H.：“非洲爪蟾酪氨酸酶家族基因的分离和发育表达。”色素细胞研究。

Yajima, I., Endo, K., Sato, S., Toyoda, R., Wada, H., Shibahara, S., Numakunai, T., Ikeo, K., Gojobori, T., Goding, C.R, Yamahioto, H.: "Cloning and functional analysis of ascidian Mit f in vivo : insights into the origin of vertebrate pigment cells."Mech

矢岛 I.、远藤 K.、佐藤 S.、丰田 R.、和田 H.、柴原 S.、沼内 T.、池尾 K.、Gojobori, T.、戈定 C.R、山日人

Isolation and developmental expression of Mitf in Xenopus laevis

• DOI: 10.1002/dvdy.20019
• 发表时间: 2004-05-01
• 期刊: DEVELOPMENTAL DYNAMICS
• 影响因子: 2.5
• 作者: Kumasaka, M;Sato, H;Yamamoto, H
• 通讯作者: Yamamoto, H