β_2-グリコプロテインIの生理機能及び抗リン脂質抗体を介した血栓症の分子機序

β_2-糖蛋白I的生理功能及抗磷脂抗体介导血栓形成的分子机制

• 批准号: 15790161
• 负责人: 泉 友則
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790161/
• 关键词: β_2-グリコプロテインI; トランスグルタミナーゼ; 架橋反応

トランスグルタミナーゼを介したβ_2-グリコプロテインI(β_2GPI)の架橋反応について、β_2GPI分子に存在する4つのグルタミン残基について各々を含む4種のペプチドを合成し試験管内での二量体化反応に対する阻害効果を検討した。過剰量の5-ビオチンアミドペンチルアミン(BAPA)存在下ではTGおよびFXIII、両酵素による二量体化が抑制されたのに対して、合成ペプチドは4種のうち、1つのみが組織トランスグルタミナーゼ(TG)による二量体化を選択的に抑制した。次に無血清条件下で24時間培養したヒト血管内皮細胞(HUVEC)におけるβ_2GPIの架橋反応を培地、付着細胞、浮遊細胞/リポソームの3画分それぞれについてウエスタンブロットにより解析した。浮遊細胞/リポソーム画分に分子量100kDaのバンドが強く認められ、このバンドの生成はトランスグルタミナーゼの阻害剤(シスタミン)の添加、また過剰量のBAPA存在下で強く抑制された。さらに、HUVECでの架橋反応における抗リン脂質抗体の効果を解析した。健常人由来IgGは架橋反応に影響を与えなかったが、これまでに特徴づけを行った抗リン脂質抗体患者由来のIgGの添加により、浮遊細胞/リポソーム画分中の架橋生成物量は顕著に増加した。以上の結果から、以下の可能性が示唆された。(1)β_2GPIはTGの特異的な基質の1つで、(2)その架橋反応は例えば内皮細胞の損傷や修復にともなって進行する。(3)抗リン脂質抗体は架橋反応、あるいは架橋生成物の膜上への結合を増強することでその生理的な機能を撹乱する。

ト ラ ン ス グ ル タ ミ ナ ー ゼ を interface し た beta _2 - グ リ コ プ ロ テ イ ン I (beta _2GPI) の bridging the 応 に つ い て, beta に _2GPI molecules exist す る 4 つ の グ ル タ ミ ン residues に つ い て each 々 を containing む four の ペ プ チ ド し を synthesis test tube で の 2 quantity body turn against 応 に す seaborne る resistance against unseen fruit を beg し 検 た. Than turning volume の 5 - ビ オ チ ン ア ミ ド ペ ン チ ル ア ミ ン (BAPA) in the presence of で は TG お よ び FXIII struck and enzyme に よ る 2 quantity body change が inhibit さ れ た の に し seaborne て, synthetic ペ プ チ ド は four の う ち, 1 つ の み が organization ト ラ ン ス グ ル タ ミ ナ ー ゼ (TG) に よ る 2 quantity body change を sentaku に inhibiting し た. Serum-free conditions で に 24 time cultivating し た ヒ ト vascular endothelial cells (HUVEC) に お け る beta _2GPI の bridging the 応 を culture, pay with cells, planktonic cells / リ ポ ソ ー ム の 3 draw そ れ ぞ れ に つ い て ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト に よ り parsing し た. Phytoplankton cells / リ ポ ソ ー ム painting に molecular weight 100 kda の バ ン ド が strong く recognize め ら れ, こ の バ ン ド の generated は ト ラ ン ス グ ル タ ミ ナ ー ゼ の resistance against tonic (シ ス タ ミ ン) の add, ま た than turning volume の BAPA で in the presence of strong く inhibit さ れ た. Youdaoplaceholder0, HUVECで <s:1> bridging anti-応 における anti-リ <s:1> lipid antibody <s:1> effect を analysis of た た. The healthy human origin IgG は bridging the 応 に influence を and え な か っ た が, こ れ ま で に, 徴 づ け を line っ た resistance リ ン lipid origin の add に の IgG antibody in patients with よ り, phytoplankton cells / リ ポ ソ ー ム draw points in の bridge products quantity は 顕 with に raised し た. The above <s:1> result ら and the following <s:1> possibility が suggest された. (1) beta _2GPI は TG の specific な matrix の 1 つ で, (2) そ の bridging the 応 は example え の ば endothelial cells damage や repair に と も な っ て in す る. (3) resistance to リ ン lipid antibodies against 応 は bridging, あ る い は bridge products の membrane へ の combining を raised strong す る こ と で そ の physiological function of な を 撹 disorderly す る.

项目成果

板垣千春, 泉友則: "実験医学別冊タンパク質実験ハンドブック(竹縄忠臣編)第3章5"羊土社. 280(75-84) (2003)

Chiharu Itagaki、Tomonori Izumi：“实验医学特别版蛋白质实验手册（竹轮忠臣编辑）第3章5”Yodosha。