Analysis on epidermal differentiation by amniotic fluid component

羊水成分对表皮分化的分析

基本信息

批准号：
20K20568
负责人：
人見清隆
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-07-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題では未分化な表皮細胞を立体的に培養することで、表皮組織に極めて近い構造へ達する再現系を対象に表皮分化の新しい制御機構について調べることを目的としている。これは、分化をする際に細胞を空気に暴露するという特殊な操作が必須である点に着目してのメカニズム解明をめざすアプローチである。この着想から同時に、空気に暴露されずとも表皮分化が生じる胎児の生育環境である「羊水」を給原にして、表皮細胞分化を促進する因子を精製同定してその活用を狙ったものである。前者の課題についてはこれまでに、空気暴露の操作で、低酸素誘導因子（HIF）が変動して分化を制御することを見出している。この転写因子が、従来の低酸素刺激に応じて作用する遺伝子群ではなく、分化のシグナルを動かす別の遺伝子制御を担う仮説を立て、クロマチン免疫沈降法(Chip-seq)を行うべく、探索に向けた条件設定を行った。さらに並行して、液相培養(空気暴露をしない場合)であっても、振とう操作を施せば、分化が回復するという発見を果たした。実際に分化がどの程度回復するのかを、遺伝子発現パターンの比較を行うと共に、低酸素環境を設定した実験についても予備的検討を進めた。一方、羊水からの表皮細胞分化促進因子については、ヤギ、マウス、トリ(卵)を給原に精製を進めており、これまでにマウスとヤギについて候補となる分子を同定した。トリについては、胎生日数の異なる羊水に、精製同定に向けて分化刺激を検討してその構成分の違いを調べている段階である。また、これらの分子を動物細胞において、組換えタンパク質として生産するための実験系を打ち立てる事も完了することができた。今後精製同定を進めつつ候補因子の分化促進能を最終年度として検討する。

该主题旨在研究繁殖系统中表皮分化的新调节机制，该机制通过以3D方式培养未分化的表皮细胞来达到非常接近表皮组织的结构。这种方法旨在通过关注涉及将细胞暴露在空气中的特殊操作的事实来阐明机制，这是必不可少的。这个想法旨在同时使用羊水，这是胎儿的增长环境，即使没有暴露于空气，也会发生，并纯化和鉴定出促进表皮细胞分化并利用它的因素。迄今为止，关于以前的问题，我们发现缺氧诱导因子（HIF）波动以控制空气暴露操纵的分化。我们已经提出了一个假设，即该转录因子负责其他基因调控，该基因调节是移动分化信号而不是对低氧刺激作用的常规基因组，并设置了搜索条件以进行染色质免疫沉淀（CHIP-SEQ）。此外，在同时，我们发现即使在液相培养中进行摇动（未暴露空气）也可以恢复分化。我们比较了基因表达模式，以查看实际恢复了多少分化，并就低氧环境实验进行了初步研究。另一方面，已经在山羊，小鼠和鸟类（卵）中对羊水进行分化促进因子的纯化为原料，并为小鼠和山羊鉴定了候选分子。对于鸟类，我们目前正在研究不同日子的羊水中的分化刺激，以确定成分的差异以识别它们。此外，有可能建立一个实验系统，用于在动物细胞中产生这些分子作为重组蛋白。将来，将进行净化识别，并将候选因素促进分化的能力视为最后一年。

项目成果

期刊论文数量（22）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

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控制上皮屏障功能的蛋白质交联酶转谷氨酰胺酶 1 基因的诱导缺失：小鼠的生成和表型分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
田村瞭太;辰川英樹;人見清隆
通讯作者：
人見清隆

空気暴露が促進する表皮分化メカニズムの解析

空气暴露促进表皮分化机制分析

DOI：
发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
0
作者：
手島裕文;辰川英樹;人見清隆
通讯作者：
人見清隆

Thrombin-deficient mutant of medaka, a model fish, displays serious retardation in blood coagulation.

模型鱼青鳉的凝血酶缺陷突变体表现出严重的凝血迟缓。

DOI：
10.1093/bbb/zbaa098
发表时间：
2021
期刊：
Biosceince, Biochemistry and Biotechnology
影响因子：
0
作者：
Watanabe Y.;Oguri R.;Suzuki R.;Ishikawa Y.;Tatsukawa H.;Hashimoto H.;Hitomi K.
通讯作者：
Hitomi K.

3次元培養細胞系での表皮分化は低酸素応答機構により制御される

3D 培养细胞系统中的表皮分化由缺氧反应机制控制

DOI：
发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
0
作者：
石田拓也;黒木秀起;亀岡ゆり;井澤哲舜;立間徹;人見清隆
通讯作者：
人見清隆

ニワトリの羊水は表皮細胞の分化促進に寄与する

鸡羊水有助于促进表皮细胞分化

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
辻徳治;川口友輔;小野川諒;辰川英樹;人見清隆
通讯作者：
人見清隆

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溝口琢郎;兒島孝明;人見清隆;中野秀雄.;Tomoo Mizugaki; Racha Arundhathi; Takato Mitsudome; Koichiro Jitsukawa; Kiyotomi Kaneda;内藤正樹，松原慶典，滝田謙一，升谷五郎;菅原清高，松本　恵，吉村　研，上谷保則，早瀬修一，伊藤敏幸
通讯作者：
菅原清高，松本　恵，吉村　研，上谷保則，早瀬修一，伊藤敏幸