細胞周期チェックポイントWeelを標的とした癌治療の研究

针对细胞周期检查点Weel的癌症治疗研究

• 批准号: 15790372
• 负责人: 橋本 修
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790372/
• 关键词: 細胞周期; Weel; Weel inhibitor; PD1660285; PD0166285; G2 arrest; apoptosis

この研究ではMouse melanoma cell line B16を用いて、in vitroの実験において、Weel inhibitorによる細胞増殖抑制のメカニズムを検討し、さらに、マウスの腹腔内にB16細胞を注入し、in vivoにおいてもWeel inhibitorがそれらの増殖を抑制できるかを検討した。In vitroではB16 mouse melanoma cell lineを0.4μMのWeel inhibitor(PD1660285以下PD285)にて処理後1)Cell cycleの変化をFACscanにて,2)CyclinB,α-Tubulin,核(PI)を蛍光顕微鏡で観察した。In vivo,では8週齢、オスのB6 black mouseのマウスを用い、1)PD285;0.4,0.8,2.0,4.0,8.0μM(/0.5ml),5day/week,4week, I.P体重の変化、腹腔内の状態を肉眼的に観察した2)B16 cells 1x10^4(/0.5ml),I.P PD285 2.0μM(/0.5ml),翌日より、5days, I.P,腹水をPBS10mlにて洗浄しながら回収、細胞数をカウントした(n=5)。3)B16 cells 1x10^4(/0.5ml),0.5x 10^4.(/0.5ml), PD285 2.0μM(/0.5ml), 5day/week, I.Pマウスの予後を検討した(n=5)。これらの実験にてB16 mouse melanoma cellを用いたIn vitroの実験において、 Weel inhibitor(PD285)はunscheduledな細胞分裂を起こさせG1 arrestを起こさせている可能性が示唆された。また、B16 cellsを腹腔内に注入するというin vivo腹膜播種モデルにおいて、Weel inhibitor(PD285)は腹水中の細胞数を有意に抑制、その予後にも寄与した。今後の有用な抗腫瘍薬になる可能性が示唆された。

こ の research で は Mouse melanoma cell line B16 を with い て, the in vitro の be 験 に お い て, Weel inhibitor に よ る cells inhibit の rights colonization メ カ ニ ズ ム を beg し 検, さ ら に, マ ウ ス の intra-abdominal に を injection し, in B16 cells vivoにお にお て て を検 Weel inhibitorがそれら <s:1> proliferation を inhibition で る る る を検 to seek た. In vitroで を B16 mouse melanoma cell lineを0.4μM <s:1> Weel inhibitor(PD1660285 below PD285)にて after treatment 1)Cell cycle transformation をFACscanにて,2) clinb,α-Tubulin, nuclear (PI)を蛍 light 顕 microscope で観 examination た た. In vivo,で 齢 8 weeks 齢, ス ス <s:1> B6 black mouse <s:1> ウスを ウスを use で, 1)PD285; 0.4, 0.8, 2.0, 4.0, 8.0 mu M (0.5 ml /), 5 day/week, 4 week, I.P weight <s:1> change, <s:1> state in the abdominal cavity を visual に観 examination た2)B16 cells 1x10^4(/0.5ml),I.P PD285 2.0μM(/0.5ml), the next day よ に観, 5days I.P, ascites をPBS10mlにて wash clean the ながら reflux, cell count をカウ た ト た た(n=5). 3) B16 cells 1 x10 (0.5 ml /) ^ 4, 0.5 x 10 ^ 4. (0.5 ml /), PD285 2.0 microns (0.5 ml /), 5 day/week, I.P マ ウ ス を after の to beg し 検 た (n = 5). こ れ ら の be 験 に て B16 mouse melanoma cell を with い た In vitro の be 験 に お い て, Weel inhibitor (PD285) は unscheduled な cell division を up こ さ せ G1 arrestを gives rise to <s:1> る る possibility が indicates された. ま た, B16 cells を に injected into the abdominal cavity す る と い う in vivo peritoneal seeding モ デ ル に お い て, Weel inhibitor (PD285) は の cells in ascites を intentionally に inhibition, そ の to after に も send し た. In the future, the possibility of <s:1> using な anti-abscess drugs になる is が suggesting された.