細胞周期チェックポイントWeelを標的とした癌治療の研究

针对细胞周期检查点Weel的癌症治疗研究

• 批准号: 15790372
• 负责人: 橋本 修
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790372/
• 关键词: 細胞周期; Weel; Weel inhibitor; PD1660285; PD0166285; G2 arrest; apoptosis

この研究ではMouse melanoma cell line B16を用いて、in vitroの実験において、Weel inhibitorによる細胞増殖抑制のメカニズムを検討し、さらに、マウスの腹腔内にB16細胞を注入し、in vivoにおいてもWeel inhibitorがそれらの増殖を抑制できるかを検討した。In vitroではB16 mouse melanoma cell lineを0.4μMのWeel inhibitor(PD1660285以下PD285)にて処理後1)Cell cycleの変化をFACscanにて,2)CyclinB,α-Tubulin,核(PI)を蛍光顕微鏡で観察した。In vivo,では8週齢、オスのB6 black mouseのマウスを用い、1)PD285;0.4,0.8,2.0,4.0,8.0μM(/0.5ml),5day/week,4week, I.P体重の変化、腹腔内の状態を肉眼的に観察した2)B16 cells 1x10^4(/0.5ml),I.P PD285 2.0μM(/0.5ml),翌日より、5days, I.P,腹水をPBS10mlにて洗浄しながら回収、細胞数をカウントした(n=5)。3)B16 cells 1x10^4(/0.5ml),0.5x 10^4.(/0.5ml), PD285 2.0μM(/0.5ml), 5day/week, I.Pマウスの予後を検討した(n=5)。これらの実験にてB16 mouse melanoma cellを用いたIn vitroの実験において、 Weel inhibitor(PD285)はunscheduledな細胞分裂を起こさせG1 arrestを起こさせている可能性が示唆された。また、B16 cellsを腹腔内に注入するというin vivo腹膜播種モデルにおいて、Weel inhibitor(PD285)は腹水中の細胞数を有意に抑制、その予後にも寄与した。今後の有用な抗腫瘍薬になる可能性が示唆された。

This study investigated the inhibition of mouse melanoma cell line B16 in vivo, in vitro, in vivo, and in vivo by injecting B16 cells into the abdominal cavity. In vitro, B16 mouse melanoma cell line was observed by FACscan with 0.4 μ M Weel inhibitor (PD1660285 or PD285). In vivo, 8 weeks old,スのB6 black mouseのス, 1) PD285; 0.4,0.8,2.0,4.0,8.0μM (/0.5ml), 5day/week, 4 week, I. P Weight change, abdominal cavity status, visual inspection 2) B16 cells 1x10^4 (/0.5ml), I. P PD 285 2.0 μ M (/0.5ml), the next day, 5 days, I. P, ascites PBS 10 ml, wash, recovery, cell count and recovery (n = 5). 3)B16 cells 1x10^4(/0.5ml),0.5x 10^4. (/0.5ml), PD285 2.0 μ M (/0.5ml), 5 days/week, I. P In vitro, Weel inhibitor (PD 285) unscheduled cell division initiation, G1 arrest initiation, and cell cycle initiation are shown. B16 cells were injected intraperitoneally into the peritoneal cavity, and the number of cells in ascites was intentionally suppressed by Weel inhibitor (PD285). In the future, the possibility of using anti-tumor drugs is shown.