プロテオグリカンによる血管障害発症機構の検討と治療への応用

蛋白多糖引起血管疾病的机制研究及其在治疗中的应用

• 批准号: 15790392
• 负责人: 清水 良子
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790392/
• 关键词: プロテオグリカン; 細胞外基質; バイグリカン; 血管障害; 血管平滑筋細胞; 細胞増殖; 細胞遊走; トランスジェニックス; 細胞外マトリックス

近年、動脈硬化症での血管障害進展に細胞外基質の主要構成物質である糖蛋白質プロテオグリカンの重要性が示唆されている。今回我々は、血管壁に多く発現するプロテオグリカンであるバイグリカンの血管特異的過剰発現マウスを樹立し、その血管障害モデルを作成してバイグリカンの血管障害発症機構における役割を初めて明らかにした。ヒトバイグリカンcDNAを血管特異的プロモーターであるαSMAの下流に挿入してC57BL/6Jマウス卵にマイクロインジェクションしバイグリカン過剰発現マウスを樹立し(tg)、更にこれにアンジオテンシンII(AngII)を慢性投与して血管障害モデルを作成し、野生型マウス(wt)での血管障害モデルとの比較検討を行った。心重量比、血圧、血漿レニン活性でtgに変化は見られなかった。大動脈など血管組織ではAngII負荷前、後ともにtg群ではwt群に比して、血管壁厚さ、血管media/lumen比が有意に増加し、更にPCNA染色陽性となる増殖細胞が有意に増加していた。又、冠動脈においては野生型に比べ著明な新生内膜の増生による内腔閉塞を認め、ヒトの冠動脈疾患の病理像に類似していた。この新生内膜の免疫組織染色から新生内膜は血管平滑筋細胞の増殖から主になることが示された。この機序の詳細な検討をおこなうため、培養血管平滑筋細胞(VSMC)を用いたin vitroの実験を施行した。VSMCをバイグリカンで刺激することにより、VSMCの遊走および増殖能の促進が示され、ウェスタンブロット法から、バイグリカンの刺激によりVSMCの細胞周期調節因子であるCdk2の発現を増加させ、p27、p21を減少させることが示された。以上より、バイグリカンがVSMCの増殖・遊走に関与し、心血管障害発症に直接関与する増悪因子であることが示された。

Progress in recent years, atherosclerosis で の vascular handicap of に extracellular matrix の main composition で あ る sugar protein プ ロ テ オ グ リ カ ン の importance が in stopping さ れ て い る. Today back to my 々 は, hemal wall に く 発 now す る プ ロ テ オ グ リ カ ン で あ る バ イ グ リ カ ン の vascular specific through turning 発 now マ ウ ス を し, そ の vascular handicap of モ デ ル を made し て バ イ グ リ カ ン の vascular handicap of 発 disease agency に お け る "at the beginning of cut を め て Ming ら か に し た. ヒ ト バ イ グ リ カ ン cDNA を vascular specific プ ロ モ ー タ ー で あ る alpha SMA の obscene に scions into し て in C57BL / 6 j マ ウ ス eggs に マ イ ク ロ イ ン ジ ェ ク シ ョ ン し バ イ グ リ カ ン before turning 発 now マ ウ ス を set し (tg) and more に こ れ に ア ン ジ オ テ ン シ ン II (AngII) を cast with chronic し て handicap of vessels モ デ ル を make し, wild type マ ウ ス (wt) で の vascular handicap of モ デ ル と の is 検 line for を っ た. Cardiac weight ratio, blood pressure, plasma レニ <s:1> activity でtgに variation <e:1> can be found in られな った った. Artery な ど vascular tissue で は AngII load before and after と も に tg group で は に wt group than し て さ, vascular wall thickness, blood vessels, media/lumen ratio が deliberately に raised し, more に PCNA positive と な る raised cells が intentionally に raised plus し て い た. Again, coronary artery に お い て は wild-type に than べ zhao Ming な neointimal の raised raw に よ る lumen occlusion を confess め, ヒ ト の の coronary artery disease pathology as に similar し て い た. The <s:1> <s:1> immunostaining of the neovasculum <s:1> of the neovasculum ら vascularized fascia cell <s:1> proliferation of the neovasculum ら mainly になる とが とが shows された. Beg を こ の machine sequence の detailed な 検 お こ な う た め, cultivating vascular smooth muscle cells (VSMC) を い た in vitro の be 験 を imposed し た. VSMC を バ イ グ リ カ ン で stimulus す る こ と に よ り, VSMC の wander お よ び raised colonization can promote が の shown さ れ, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method か ら, バ イ グ リ カ ン の stimulus に よ り VSMC の cell cycle regulatory factor で あ る Cdk2 の 発 now を raised さ せ, p27, p21 を reduce さ せ る こ と が shown さ れ た. Above よ り, バ イ グ リ カ ン が VSMC の raised colonization, wandering に masato and し, cardiovascular handicap of 発 disease に masato directly with す る raised 悪 factor で あ る こ と が shown さ れ た.

项目成果

トランスジェニックマウスを用いた細胞外マトリックス糖蛋白質バイグリカンの血管における昨日の検討

使用转基因小鼠研究血管中的细胞外基质糖蛋白双聚糖

• 发表时间: 2005
• 期刊: 血圧 12
• 作者: 清水良子;篠村裕之;猿田享男
• 通讯作者: 猿田享男

Functional characterization of podocan, a member of a new class in the small leucine-rich repeat protein family

• DOI: 10.1016/s0014-5793(04)00250-9
• 发表时间: 2004-04-09
• 期刊: FEBS LETTERS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Shimizu-Hirota, R;Sasamura, H;Saruta, T
• 通讯作者: Saruta, T

Kobayashi, Shimizu-Hirota et al.: "Hepatocyte growth factor regulates proteoglycan synthesis in interstitial fibroblasts"Kidney International. 64(4). 1179-1188 (2003)

Kobayashi、Shimizu-Hirota 等人：“肝细胞生长因子调节间质成纤维细胞中的蛋白聚糖合成”肾脏国际。